徐宏伟，张俊英，马杉姗，汤晓闯，马素永，2，聂李亚，2，许松山，2

1.北京诺思兰德生物技术股份有限公司，北京 100085；2.北京市裸质粒基因治疗药物工程技术研究中心，北京 100085

技术方法

重组人胸腺素β4生物学活性测定方法的建立

徐宏伟1，张俊英1，马杉姗1，汤晓闯1，马素永1，2，聂李亚1，2，许松山1，2

1.北京诺思兰德生物技术股份有限公司，北京 100085；2.北京市裸质粒基因治疗药物工程技术研究中心，北京 100085

目的：建立适用于重组人胸腺素β4（rhTβ4）体外质量控制的生物学活性测定方法，用于该制品的生物学活性评价。方法：利用ECV304细胞迁移法，摸索细胞密度、玻连蛋白（Vn）浓度、rhTβ4浓度等影响因素，并对试验条件进行优化及方法验证。结果：细胞密度为0.5×104/孔、Vn浓度为12.5 μg/mL、rhTβ4浓度为200 nmol/L、孵育时间24 h和细胞迁移时间4 h时，细胞迁移率较高。结论：建立了rhTβ4生物学活性测定方法，该方法专属性强、重复性好、准确性高，可用于rhTβ4生物学活性测定。

重组人胸腺素β4；活性检测；细胞迁移

胸腺素β4（thymosin β4，Tβ4）是一种在多种组织均有表达的多肽，广泛分布于各组织、器官和细胞中，作为哺乳动物细胞内一种主要的肌动蛋白调节分子，对受损组织的再生、重塑和愈合起重要作用[1-2]。研究表明，Tβ4具有多方面生物学活性，能够促进创伤区域表皮的细胞迁移、血管的生成和胶原沉积，具有消炎和促进创伤愈合的功效，在治疗皮肤、角膜创伤，心肌梗死，抗肿瘤等方面有着广阔的应用前景[3-5]。

目前Tβ4的制备方法有化学合成和基因工程两种，化学合成方法成本较高，而利用基因工程技术获得重组人Tβ4（recombinant human Tβ4，rhTβ4），并将其开发成为治疗用生物制品Ⅰ类新药，具有成本低、技术成熟、可大量生产等优势。……