代建宁，邓彩霞，景调平，姥伟，杨海旭

解放军第五医院 a.骨科中心；b.高压氧；c.麻醉手术科；宁夏 银川 750004

Runx2真核表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞增殖的影响

代建宁a，邓彩霞b，景调平c，姥伟a，杨海旭a

解放军第五医院 a.骨科中心；b.高压氧；c.麻醉手术科；宁夏 银川 750004

目的：构建人源Runx2过表达重组载体，探讨Runx2对骨肉瘤细胞增殖能力的影响。方法：以HEK293细胞总RNA为模板，反转录为cDNA，通过PCR技术扩增Runx2全长基因并连接至真核表达质粒pcDNA3.1，筛选阳性克隆进行序列测定后，转染至骨肉瘤细胞Saos-2和U2-OS，通过MTT实验验证Runx2调节细胞增殖的能力。结果：构建了pcDNA3.1-Runx2真核表达载体，并在骨肉瘤细胞Saos-2和U2-OS中高表达Runx2蛋白；Runx2高表达后，骨肉瘤细胞增殖能力显著增加。结论：构建了Runx2基因高效真核表达载体，并证明Runx2可以促进骨肉瘤细胞的增殖。

Runx2；真核表达载体；骨肉瘤细胞；细胞增殖

骨肉瘤严重威胁着人们健康，高发于青少年人群，位列青少年肿瘤第三位，仅次于淋巴瘤和脑肿瘤[1]。根据其组织成分，可将骨肉瘤的亚型分为成骨细胞型、成软骨细胞型、成纤维细胞型、成韧带型和小细胞型。深入探讨其发生机制，对于骨肉瘤的诊断和治疗均具有重要意义。Runx2（Runt-related transcription factor 2）是 Runt相关转录因子家族成员。前期研究表明，Runx2在成骨分化的信号途径中发挥重要作用，能诱导间充质干细胞向成骨细胞定向分化和成熟，促进骨组织的发育和伤口愈合[2-3]。本研究中，我们构建了Runx2的高效真核表达载体，并验证了其对骨肉瘤细胞增殖能力的影响，为后续研究Runx2在骨肉瘤细胞发生发展中的作用打下基础。……