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人ERK2基因对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响

2017-10-24韩笑刘莹梁迎春闫志风徐小洁梁九思洪甜尤文叶陈思禹黄俊叶棋浓刘丹

生物技术通讯 2017年5期
关键词:生长

韩笑,刘莹,梁迎春,闫志风,徐小洁,梁九思,洪甜,尤文叶,陈思禹,黄俊,叶棋浓,刘丹

1.锦州医科大学 附属第一医院,辽宁 锦州 121000;2.解放军总医院,北京 100853;3.军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100850

人ERK2基因对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响

韩笑1,3,刘莹1,2,梁迎春3,闫志风2,徐小洁3,梁九思1,洪甜3,尤文叶2,陈思禹2,黄俊3,叶棋浓3,刘丹1

1.锦州医科大学 附属第一医院,辽宁 锦州 121000;2.解放军总医院,北京 100853;3.军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100850

目的:构建携带Myc标签的人细胞外信号调节激酶2(ERK2)的真核表达载体,表达Myc-ERK2融合蛋白,检测其对人视网膜母细胞瘤细胞生长的影响。方法:采用PCR技术从乳腺文库中扩增人ERK2基因序列,将其插入pXJ-40载体;将重组质粒与空载体转染人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞系后,Western印迹检测表达情况,并进行生长曲线实验。结果:双酶切和测序鉴定表明Myc-ERK2真核表达质粒构建成功;转染WERI-Rb-1细胞后融合蛋白获得表达,生长曲线实验结果表明ERK2可促进肿瘤细胞的生长。结论:携带Myc标签的人ERK2基因的真核表达载体能在人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞中表达,且能促进该细胞的生长。本实验为进一步研究ERK2在肿瘤尤其是眼恶性肿瘤中的功能奠定了基础。

细胞外信号调节激酶2(ERK2);真核表达;人视网膜母细胞瘤细胞

细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)成员之一[1-2],其N端与C端相互卷曲形成一种典型的双叶结构的多肽链[3]。ERK家族有5个亚族,即ERK1、ERK2、ERK3、ERK4和 ERK5。对 ERK1和ERK2调节不同细胞内的减数分裂和有丝分裂等一系列生理活动的研究比较明确[4]。……

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