HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞实验研究①
2017-10-24刘雪丽张洁婷吴诗品李体远金宁一
朱 娜 刘雪丽 仇 妮 张洁婷 吴诗品 李体远 郭 焱 李 昌 金宁一
(青岛市中心医院药学部,青岛 266042)
·基础免疫学·
HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞实验研究①
朱 娜 刘雪丽 仇 妮 张洁婷 吴诗品②李体远②郭 焱③李 昌④金宁一④
(青岛市中心医院药学部,青岛 266042)
目的构建携带增强型绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的HIV-1假病毒;通过HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞(immatural dendritic cell,iDC)实验探讨病毒与细胞的相互作用。方法利用慢病毒包装系统构建携带EGFP基因的HIV-1假病毒,通过RT-PCR扩增HIV-1假病毒中的EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC,对HIV-1假病毒感染iDC后的基因组整合和转录水平进行检测,观察被感染iDC中EGFP基因的表达。结果构建的HIV-1假病毒通过RT-PCR结果显示扩增得到EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC后,在基因组整合和转录水平检测中都扩增得到了EGFP基因,荧光显微镜观察被HIV-1假病毒感染的iDC,观察到iDC表达绿色荧光蛋白。结论成功构建携带EGFP基因的HIV-1假病毒;HIV-1假病毒可以感染iDC,并将其遗传物质整合到iDC基因组中,并经过转录和翻译使iDC表达EGFP。
HIV-1假病毒;未成熟树突状细胞;感染实验
艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)由人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)引起,HIV-1为主要病原,是循环CD4+T淋巴细胞显著下降、机会感染及恶性疾病为特征的继发性免疫缺陷综合征[1]。树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是目前已知功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presentation cell,APC),主要诱导体内免疫反应,是抗感染免疫的中心环节。一般认为HIV-1侵入人体后,首先感染DC,DC将病毒抗原进行处理,提呈给T淋巴细胞,进而激发一系列抗病毒免疫反应[2,3],DC在HIV感染与免疫中起到重要作用。DC家族的特点之一是成熟过程,在这个过程期间,他们改变形态和功能[4]。……
