徐陈陈 董健健 程楠 王训 喻绪恩○☆

α-硫辛酸联合青霉胺对TX乳鼠神经元P38 M APK通路的调控作用研究☆

徐陈陈*董健健*程楠*王训*喻绪恩*○☆

目的研究α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)联合青霉胺(Penicillamine,PCA)对Wilson病(Wilson disease,WD)模型TX乳鼠神经元P38 MAPK通路的调控机制。方法本实验乳鼠神经元通过原代方法分离培养所得，分为正常对照组、模型组、ALA组、PCA组及联合组。采用流式细胞仪检测药物治疗前后活性氧释放量及JC-I荧光强度的变化；Western blot法检测经药物作用后P38丝裂原活化蛋白激酶、细胞色素C、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3蛋白的表达。结果经流式细胞仪检测结果可知ALA、PCA及联合用药均能减少神经元内ROS释放量且其MFI分别为59.29±1.22、53.19±1.34及52.46±1.23，增进JC-1的荧光强度(P＜0.01)，且同ALA组和PCA组比，联合组ROS释放量明显降低，JC-1的荧光强度显著增强。 Western blot检测发现与正常组相比，模型组乳鼠神经元内P38MAPK，Cyt C，Caspase 9，Caspase 3蛋白含量显著增加(P＜0.01)；与模型组相比，LA组、PCA组及联合组乳鼠神经元内P38 MAPK，Cyt C，Caspase 9，Caspase 3蛋白表达水平明显下降；联合组P38 MAPK，Cyt C，Caspase 9，Caspase 3蛋白含量较LA组及PCA组减少。结论ALA联合PCA可促进铜排出，降低高铜诱导的线粒体损伤，降低高铜神经毒性，延缓神经元凋亡，改善WD神经系统损伤症状。

细胞凋亡 Wilson病氧化应激 神经毒性

Wilson病(Wilson disease,WD)是一种表现为铜沉积于肝脑等器官和组织的遗传性疾病。本课题单位2015年在对2695例WD患者统计中发现以神经系统症状首发的占56.33%，且多数患者在病程后期都会出现一定程度的神经损害，给患者生活的各个方面带来了非常不利的影响[1]。本研究通过流式细胞仪及Western blot技术观察线……