张华奥， 逯久幸， 李 静， 李永华

(河南农业大学林学院，河南 郑州 450002)

菊花去饱和酶CmSAD基因的克隆与表达分析

张华奥， 逯久幸， 李 静， 李永华

(河南农业大学林学院，河南 郑州 450002)

以秋菊(ChrysanthemummorifoliumRamat.)抗寒品种‘星光灿烂’为材料，利用RT-PCR和RACE方法从叶片中克隆△9硬脂酰-ACP去饱和酶(Stearoyl-ACP desaturase，SAD)基因，命名为CmSAD，GenBank登录号为KC529335。该基因cDNA全长1 203 bp，编码401个氨基酸，相对分子质量为45.57 kD，等电点为6.48，编码的氨基酸序列与新疆雪莲同源性最高(80.29%)。通过对该蛋白进行生物信息学分析得出其没有跨膜结构，主要存在于叶绿体基质中，N端含有一段包含60个氨基酸的叶绿体转运肽。通过实时荧光定量PCR研究低温胁迫下叶片和根系中CmSAD基因的表达量变化，该基因在叶片和根系中均有表达。根系中CmSAD基因的表达量随着温度的降低而降低，16 ℃时表达量最高；叶片中CmSAD表达量随着温度的降低先升高再降低，5 ℃时最高。随着温度的降低，菊花叶片和根系中CmSAD基因的表达情况表现出一定的差异。CmSAD基因的表达变化与温度有关，为低温胁迫下菊花脂肪酸代谢的分子机理研究提供了基础。

菊花；低温；CmSAD基因；克隆；表达分析

△9硬脂酰-ACP去饱和酶(Stearoyl-ACP desaturase，SAD)是影响植物细胞膜脂肪酸不饱和程度的最直接因素，细胞膜相变温度的高低取决于膜脂不饱和度，SAD 是催化不饱和脂肪酸合成的关键酶[1-2]。研究人员已从红花、银杏等70余种植物中克隆出了SAD基因[3]。KACHROO等[4]研究表明，SAD参与到拟南芥的防御和生长调节过程中，罗秀芹等[5]对SAD的结构和功能进行了预测。对白蜡树的研究表明，SAD基因在白蜡茎中表达量较高[6]。……