王东旭， 霍婷婷， 田耀文， 赵 磊1, △

(1济南大学，山东省医学科学院医学与生命科学学院， 山东 济南 250200； 2郑州大学第一附属医院，河南 郑州 450001； 3山东大学附属山东省肿瘤医院肝胆外科， 山东 济南 250117)

·实验技术·

人结直肠癌肝转移瘤中CD11b+髓系细胞分选方法的建立与鉴定*

王东旭1, 3， 霍婷婷2, 3， 田耀文1, 3， 赵 磊1, 2, 3△

(1济南大学，山东省医学科学院医学与生命科学学院， 山东 济南 250200；2郑州大学第一附属医院，河南 郑州 450001；3山东大学附属山东省肿瘤医院肝胆外科， 山东 济南 250117)

目的： 从结直肠癌肝转移瘤组织中分选出高纯度的CD11b+髓系细胞，从而建立从一种组织中获得特异单细胞的方法。方法: 采用机械联合酶消化法将实体瘤组织制备成单细胞悬液；利用流式细胞术分选出CD11b+髓系细胞，并回测细胞纯度；采用免疫细胞化学技术对分选出细胞的特异性进行鉴定；采用吉姆萨和台盼蓝染色对获得细胞进行评价。结果: 流式细胞术能从机械联合酶消化法制备的单细胞悬液中分选出高纯度、足够数量的CD11b+细胞；分选前细胞阳性率与分选后纯度的差异有统计学意义(P<0.01)，分选后纯度达到实验研究的要求(P<0.05)；免疫细胞化学技术验证了分选细胞的特异性；分选后的细胞形态完整，活性良好。结论: 机械联合酶消化法制备的单细胞悬液，经过流式细胞术分选，能够分选出高纯度、活性良好且形态完整的特异性细胞，操作方法稳定可重复，满足进一步研究的要求。

结直肠癌肝转移瘤； 流式细胞术； 细胞分选； CD11b+髓系细胞； 免疫细胞化学

结直肠癌是世界范围内最常见的肿瘤类型之一，肝转移是结直肠癌患者的主要致死因素[1-2]。目前而言结直肠癌肝转移患者的五年生存期并没有多大改观，有效治疗率依旧保持在低水平[3]。肿瘤的转移是一个多步骤的复杂过程，对肝转移的抑制是治疗结直肠癌有效的手段[4]。……