潘祉谕， 达静静， 董 蓉， 吴 静， 皮明婧， 俞佳丽， 孙 翼， 聂瑛洁， 查 艳△

(1贵州医科大学免疫学教研室， 贵州 贵阳 550004； 贵州省人民医院 2肾内科， 3中心实验室， 贵州 贵阳 550002)

Snail1/IGF-1信号通路介导高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT*

潘祉谕1， 达静静2， 董 蓉2， 吴 静2， 皮明婧2， 俞佳丽1， 孙 翼1， 聂瑛洁3△， 查 艳2△

(1贵州医科大学免疫学教研室， 贵州 贵阳 550004； 贵州省人民医院2肾内科，3中心实验室， 贵州 贵阳 550002)

目的： 观察高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中锌指转录因子Snail1和胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)的表达变化，并初步探讨Snail1与IGF-1在糖尿病肾脏病(diabetic kidney di-sease，DKD)上皮-间充质转化(epithelial to mesenchymal transition，EMT)过程中的关系。方法: 高糖培养大鼠近端肾小管上皮细胞系NRK-52E 72 h后，给予Snail1 siRNA和IGF-1 siRNA处理，分为高糖组、non-targeting (NT) siRNA组、Snail1 RNAi组和IGF-1 RNAi组，并设置对照组。于转染后48和72 h两个时点收获细胞。分别用实时荧光定量PCR检测细胞Snail1、IGF-1、 E-钙黏蛋白(E-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin，FN)的mRNA表达，用免疫荧光方法检测各蛋白的表达。结果: 高糖诱导NRK-52E细胞E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)，FN的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01)；同时，Snail1和IGF-1的mRNA和蛋白表达也明显升高(P<0.01)。Snail1 RNAi组与高糖组比较，细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01)，FN、Snail1和IGF-1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)，Snail1的mRNA表达减少62.8%。与高糖组比较，IGF-1 RNAi组细胞IGF-1的mRNA表达减少61.1%，E-cadherin 的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01)，FN的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。NT组E-cadherin、FN、Snail1及IGF-1的mRNA和蛋白表达与高糖组比较差异无统计学显著性。Pearson相关性分析显示，NRK-52E细胞中Snail1与IGF-1蛋白的表达呈显著正相关(r=0.852,P<0.01)。结论: Snail1及IGF-1的mRNA和蛋白在高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT过程中表达升高，且沉默Snail1基因，IGF-1表达随之减少，提示Snail1/IGF-1可能促进DKD时肾小管上皮细胞EMT。

糖尿病肾脏病； Snail1蛋白； E-钙黏蛋白； 纤维连接蛋白

糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease，DKD) 是糖尿病(diabetic mellitus，DM)最常见的慢性微血管并发症，可发展至终末期肾功能衰竭，是DM患者的主要死因之一。上皮-间充质转化(epithelial to mesenchymal transition，EMT)既是多细胞生物胚胎发育中的基础过程，也是肿瘤侵袭和转移的重要机制。近年来，动物模型和肾病患者肾组织活检结果均证明了纤维化肾脏存在肾小管上皮-肌成纤维细胞转分化(tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation，TEMT)，在DKD肾小管间质纤维化发生、发展中也存在TEMT现象[1-3]。新近研究还发现，阻断TEMT可有效减轻肾脏纤维化，改善肾功能，表明TEMT在肾脏纤维化过程中发挥重要作用，但目前对其分子调节机制了解甚少[4]。……