邓益斌， 肖树荣， 许桂丹， 黄赞松

(右江民族医学院附属医院医学检验中心，广西 百色 533000)

反义锁核酸封闭c-myc第二外显子翻译起始区对肝癌细胞凋亡的影响*

邓益斌， 肖树荣， 许桂丹， 黄赞松△

(右江民族医学院附属医院医学检验中心，广西 百色 533000)

目的： 探讨针对c-myc第二外显子翻译起始区的反义锁核酸对肝癌细胞活力和凋亡的影响。方法: 设计合成能特异性封闭c-myc基因第二外显子翻译起始区的反义寡核苷酸、硫代寡核苷酸和锁核酸，分别以阳离子脂质体介导转染HepG2细胞，采用RT-PCR检测细胞内c-Myc的mRNA表达变化；Western blot检测细胞内c-Myc的蛋白表达变化；流式细胞技术检测细胞凋亡情况；MTT法检测反义锁核酸的细胞毒性作用。结果: 转染第5天后，反义锁核酸组c-Myc的mRNA相对表达量为0.335±0.016，明显低于对照组(P<0.05)；c-Myc蛋白相对表达量为0.448±0.037，也明显低于对照组(P<0.01)；凋亡细胞比例为32%±6%，显著高于对照组(P<0.05)。结论: 针对c-myc第二外显子翻译起始区的反义锁核酸能有效促进肝癌细胞的凋亡。

肝细胞癌；c-myc基因； 反义锁核酸

原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是常见的恶性肿瘤之一，占我国肝癌的90%以上，严重威胁着人类的生命健康，自20世纪90年代起，我国肝癌死亡率上升为肿瘤的第2位。c-myc是细胞原癌基因之一，与肿瘤的发生发展关系密切，位于人类染色体8q24区，由3个外显子和2个内含子组成，其中第1外显子无编码序列，只起调控作用，第2、3外显子共同编码包含439个氨基酸残基的蛋白质，该蛋白主要与Max形成异二聚体后再与DNA核心序列结合，调控基因转录与表达[1-3]。据此推测，针对c-myc第二外显子翻译起始区设计合成反义锁核酸有可能会影响c-Myc的mRNA及蛋白的表达，通过影响肿瘤细胞增殖和凋亡发挥抗肿瘤作用。因……