陈君颖?黄清勇?张美雪?邓龙生

[摘要] 目的 研究测定男性不育患者精浆MDA、SOD活性的临床价值。 方法 120例患者采用随机数字表法分为三组，健康对照组、白细胞精子症组和少弱精子症组，比较MDA、SOD活性。 结果 少弱精子症组与白细胞精子症组精浆MDA明显高于健康对照组；白细胞精子症组精浆MDA明显高于少弱精子症组，差异有统计学意义（P<0.01）。少弱精子症组与白细胞精子症组精浆SOD明显低于健康对照组（P<0.01）；白细胞精子症组精浆SOD明显低于少弱精子症组（P<0.01）。 结论 ROS是导致男性不育症的一个重要病因，男性不育患者精浆MDA和SOD的测定对男性不育症的诊断具有重要的临床价值。

[关键词] 男性不育症；精浆；超氧化物岐化酶；丙二醛

[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）16-242-03

Clinical significance of seminal plasma MDA and SOD activity in infertile patients

CHEN Junying1 HUANG Qingyong1 ZHANG Meixue1 DENG Longsheng2

1.Clinical Laboratory，Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine，Xiamen 361009，China；2.Department of Andrology，Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine，Xiamen 361009，China

[Abstract] Objective To observe the clinical significance of seminal plasma MDA and SOD activity in infertile patients. Methods 120 patients were randomly divided into three groups，healthy control group，leukocytospermia group and oligoasthenozoospermia group.The MDA，SOD activity were compared. Results The seminal plasma MDA of oligoasthenozoospermia group and leukocytospermia group were significantly higher than that of healthy control group.The seminal plasma MDA of leukocytospermia group was significantly higher than that of oligoasthenozoospermia group （P<0.01）.The seminal plasma SOD of oligoasthenozoospermia group and leukocytospermia group were significantly lower than that of healthy control group （P<0.01）.The seminal plasma SOD of leukocytospermia group was significantly lower than that of oligoasthenozoospermia group （P<0.01）. Conclusion ROS is an important cause of male infertility.The determination of seminal plasma MDA and SOD in male infertility patients has important clinical value in the diagnosis of male infertility.

[Key words] Male infertility；Seminal plasma；Superoxide dismutase；Malondialdehyde

活性氧（Reactive oxygen species，ROS）引起脂質过氧化损伤导致精子结构和功能损害是男性不育症的一个重要原因，越来越受到临床医师的关注[1-2]。本研究拟通过检测白细胞精子症和少弱精子症患者精浆中反映脂质过氧化损伤丙二醛（Malondialdehyde，MDA）[3]和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的含量[4]并与健康男性进行比较，从多角度为男性不育的诊疗提供实验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

白细胞精子症组40例，少弱精子症组40例，

研究对象病例均来自2014年1月～2016年6月厦门中医院男科门诊就诊的患者，婚后性生活正常，未采取避孕措施1年以上而女方未孕育，无性功能障碍病史，无外伤及遗传性疾病家族史，而且无明显睾丸、附睾及输精管异常，女方生育能力经检查正常。平均年龄30.5岁。健康对照组40例，来自有二胎孕前检查的精液检查者平均年龄32.1岁，以相同方法取材，检测。

1.2 方法

1.2.1 精液收集与处理 精液标本采集：禁欲（包括遗精和手淫）3～7d，以3～5d为宜，手淫采集新鲜精液，置清洁干燥无菌尿杯内，15～30分钟内手心保温送检，置37℃水浴箱内，30分钟后待其完全液化，检测精液外观、量、精子密度、活动力、活动率、液化时间等指标。精液以1000×ɡ离心10min，初步分离精子和精浆。精浆再经5000×ɡ离心15min后其上清液保存于-20℃待测。endprint

1.2.2 试剂与仪器 （1）试剂：SOD、MDA，ELISA检测试剂盒（批号Jan2017）均购自上海江莱生物科技有限公司；（2）仪器：SSW–600–2S型微电脑电热恒温水槽；IMarkTM.酶标仪；Microfuge 22R centrifuge 离心机。

1.2.3 检测与方法 精子密度和精子活动率用西班牙SCA计算机辅助精子质量分析系统检测。SOD、MDA活性测定按照试剂盒操作说明书进行测定。

1.2.4 分组 （1）健康对照组40例：a級精子>25%或（a+b）级精子>50%，精子活率>70%，精子密度≥20×109/L，有生育史；（2）少弱精子症组40例：a级精子<25%或（a+b）级精子<50%，精子活率<70%，精子密度<20×109/L；（3）白细胞精子症组40例：精液中白细胞>1.0×106/mL；

1.3 统计学处理

采用SPSS13.0软件包，计量资料以（）表示，采用方差分析，计数资料以百分数表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

对健康对照组、少弱精子症组与白细胞精子症组精浆MDA活性进行方差分析结果表明有统计学意义（F=111.337，P<0.05），两两比较结果显示：少弱精子症组与白细胞精子症组MDA活性明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；白细胞精子症组精浆MDA活性明显高于少弱精子症组，差异有统计学意义（P<0.01）。健康对照组、少弱精子症组与白细胞精子症组精浆SOD活性进行方差分析结果显示有统计学差异（F =291.741，P<0.05），两两比较分析结果为：少弱精子症组与白细胞精子症组精浆SOD活性明显低于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；白细胞精子症组精浆SOD活性明显低于少弱精子症组，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。

3 讨论

ROS主要由内源和外源性的因素产生。精液中的精子细胞和白细胞是ROS主要的内源性来源，而精索静脉曲张，吸烟，感染，环境因素，如毒素，辐射等可导致外源性ROS产生[5-7]。在生理情况下，ROS有利于维持精子细胞的正常功能。而ROS产

生过多，超过了机体抗氧化体系的还原能力时则可引起氧化应激，导致精子膜、精子线粒体、精子DNA受损，破坏精子功能和存活，是造成男性不育症的重要病因之一[8-9]。

已研究表明，ROS引发脂质过氧化产生的降解产物，特别是醛式产物（如MDA）对细胞具有毒性作用，它破坏精子膜的流动性、完整性，导致精子运动能力下降甚至丧失，从而影响精子受精能力[10-11]。机体内存在抗氧化防御系统，其中包括SOD等抗氧化酶和维生素C、维生素E、谷胱甘肽等非酶类抗氧化剂，目前认为精浆中SOD作为体内清除ROS的主要酶，可清除中和ROS对精子的潜在毒性作用。ROS产生和SOD清除保持动态平衡，保持正常生育能力的基础[12-13]。

本研究结果表明少弱精子症组精浆MDA明显高于健康对照组，从结果中提示ROS的脂质过氧化产物MDA增加会导致精子的数量和活率低。少弱精子症组精浆SOD明显低于健康对照组。从结果中提示少弱精子症组精浆中清除ROS的抗氧化剂SOD明显减少。这种抗氧化剂与ROS的脂质过氧化损伤的不平衡可能是少弱精子症的重要原因。

Ali等[14]研究显示当精液中的白细胞>1×106WBC/mL所产生的ROS可诱导精子膜脂质过氧化损伤。Ashok等[15]研究表明低水平白细胞精子（0.1 ～ 1.0×106WBC/mL）也产生ROS，它可引起精子DNA碎片而导致精子DNA损伤。

本研究结果表明白细胞精子症组MDA明显高于健康对照组，从结果中提示精浆白细胞升高，导致ROS增高，诱导精子膜脂质过氧化损伤。白细胞精子症组精浆SOD明显低于健康对照组，且明显低于少弱精子症组，推测与白细胞有抑制SOD生成有关。

综上所述，ROS是男性不育症的一个重要原因，ROS的脂质过氧化产物MDA和抗氧化剂SOD的动态平衡是保持正常生育能力的基础。本研究结果提示精浆MDA和SOD的测定对男性不育症的诊断具有重要的临床价值。

[参考文献]

[1] Bayejid H，Rakibul I，Firoza B，et al.Oxidative stress induced sperm DNA damage，a possible reason for male infertility[J].Iran J Reprod Med，2015，13（9）：525-532.

[2] 李堂林，翁治委，周少虎.生殖系统氧化应激损伤的动物实验方法研究进展[J].医学综述，2015，21（6）：991-994.

[3] 焦瑞宝，冯恒孝，唐吉斌，等.不育患者精液的氧化应激对精子DNA完整性等参数的影响[J].检验医学，2013，28（6）：487-491.

[4] 马宝良，付生军，卢建中，等.罗布麻宁治疗少弱精子症模型小鼠的作用机制[J].中华男科学杂志，2016，22（7）：649-653.

[5] 刘冰，马栋，毛鹏飞，等.氧化应激损伤在男性不育症中的影响[J].中华男科学杂志，2014，20（10）：927-931.

[6] Ashok A，Eva T and Rakesh S.Relationship amongst teratozoospermia，seminal oxidative stress and male infertility[J].Reprod Biol Endocrinol，2014，12（1）：45-53.

[7] 符浩，宋汶珂，凌晓辉，等.精索静脉曲张不育患者氧化应激水平和精子DNA完整性及精液参数的相关性分析[J].中华男科学杂志，2016，22（6）：530-533.

[8] 马国燕，卢静，景丽.精子功能检测在男性不育诊治中的应用[J].中国计划生育学杂志，2015，23（1）：61-63.

[9] 刘建国，赵红乐，金保方.氧化应激与男性不育研究进展[J].中华中医药学刊，2016，34（9）：2104-2106.

[10] 游永强，龚道元，李子萍，等.男性不育患者精液活性氧和精浆丙二醛测定临床价值研究[J].检验医学与临床，2012，17（9）：2113-2117.

[11] 石明华，李慕军.男活性氧与男性不育相关性的研究进展[J].中国临床新医学，2013，6（5）：487-491.

[12] Renata W，Jan Karol，Wolski，et al.The role of oxidative stress and antioxidants in male fertility[J].Cent European J Urol，2013，66（1）：60-67.

[13] 邓龙生，卢太坤，陈进春，等.活性氧对精子功能影响研究进展[J].中国男科学杂志，2016，30（7）：61-63.

[14] Ali N，Mohammad A，Iman H，et al.Seminal bacterial contaminations：Probable factor in unexplained recurrent regnancy loss[J].Iran J Reprod Med，2013，11（11）：925-932.

[15] Ashok A，Aditi M，Saad A，et al.Reactive oxygen species and sperm DNA damage in infertile men presenting with low level leukocytospermia[J].Reprod Biol Endocrinol，2014，12（1）：126-134.

（收稿日期：2017-02-14）endprint