吉小芳，俞慧清，岳亮亮，徐旭俊，陈建泉，成国祥，刘宗平

技术方法

山羊肺泡巨噬细胞的分离、培养与鉴定

吉小芳1,2，俞慧清1*，岳亮亮1,3，徐旭俊1，陈建泉1，成国祥1，刘宗平2

巨噬细胞是机体造血系统中可塑性较强的细胞，存在于机体的多个组织中，并且具有强大的功能多样性。巨噬细胞具有吞噬和消化病原体、感染细胞及死亡细胞碎片、募集和调节其他免疫细胞参与炎性反应及帮助组织修复等功能[1,2]。当机体受到抗原刺激时，血液中的单核细胞在趋化因子的引导下，进入抗原侵入的局部组织，进一步分化成各类炎症巨噬细胞。

肺泡巨噬细胞是机体抵抗病原微生物侵袭肺脏的第一道防线，接触到致病因子后，肺泡巨噬细胞伸出伪足将其包围形成封闭小体，与细胞内大的溶酶体融合，达到杀死致病因子的目的。但有一些致病因子在进化过程中，产生了抵御机体免疫的机制，如结核杆菌中的硫酸鸟苷酯可抑制巨噬细胞中吞噬体与溶酶体结合，使结核杆菌在巨噬细胞中长期生存[3]。另一方面，肺泡巨噬细胞还参与特异性免疫[4,5]，对抗原进行加工提呈，分泌多种细胞因子调节、启动炎性反应，是研究肺部感染的重要细胞模型。

目前，已有关于小鼠、猪、牛等巨噬细胞分离培养方法的报道[6-9]，但关于山羊肺泡巨噬细胞的体外分离培养仍有待充实。本研究旨在前人研究的基础上，结合肺气管灌洗及密度梯度离心，从山羊肺脏中获得高纯度、高活性的肺泡巨噬细胞，为深入研究巨噬细胞的生物特性和抗胞内菌的免疫功能研究奠定基础。……