重组AthrobacterramosusS34MTSase和MTHase的酶学性质及其制备海藻糖的应用条件优化
2017-09-03王魁宿玲恰吴敬陈晟
王魁, 宿玲恰, 吴敬, 陈晟*
1(江南大学, 食品科学与技术国家重点实验室,江苏 无锡,214122) 2(江南大学,生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡,214122)
研究报告
重组AthrobacterramosusS34MTSase和MTHase的酶学性质及其制备海藻糖的应用条件优化
王魁1,2, 宿玲恰1,2, 吴敬1,2, 陈晟1,2*
1(江南大学, 食品科学与技术国家重点实验室,江苏 无锡,214122) 2(江南大学,生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡,214122)
以淀粉为底物,通过麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose synthase, MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltosyltrehalose hydrolase,MTHase)的共同作用生产海藻糖是一种经济高效的方法。对ArthrobacterramosusS34来源并分别在E.coliBL21(DE3)中表达的MTSase和MTHase的酶学性质进行研究,发现MTSase的最适温度为45 ℃,最适pH为7.0,MTHase的最适温度为55 ℃,最适pH为6.0。随后用2种酶共同作用生产海藻糖,优化反应条件,考查反应温度、初始pH、底物DE值、加酶量以及底物浓度等因素对酶转化过程中海藻糖产率的影响。最佳酶转化条件为反应温度45 ℃、初始pH5.5,底物DE值8.5,加酶量分别为MTSase最小加量15.75 U/g淀粉,MTHase最小加量7.5 U/g淀粉。
海藻糖;麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose synthase, MTSase);麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltosyltrehalose hydrolase, MTHase);酶学性质;酶转化
海藻糖是一种在自然界中普遍存在的非还原性二糖,以稳定的α-1,1-糖苷键连接,不能被α-葡萄糖苷酶分解[1]。海藻糖无毒,作为糖类能够为生物体提供能量和碳源。另有研究表明,当海藻糖与蛋白质、脂质、组织、器官等共存时,能够帮助它们抵抗环境压力,因此海藻糖还可用于生物物质的保存[2-3]。
不同的酶系统可以有效地以麦芽糖、蔗糖和淀粉作为底物分别产生海藻糖[4-6]。……
