尚启亮 黄雅婷 龚羚云

(安徽省合肥市第一中学 230601)

“观察DNA和RNA在细胞中的分布”是高中生物学教学中一个重要的实验，人教版教材选择口腔上皮细胞为例介绍了实验的过程。同时，也给出了两幅实验结果图，分别是口腔上皮细胞染色结果图和洋葱鳞片叶内表皮细胞染色结果图。从图中可以看到细胞核区域为绿色，细胞质区域为红色。但是，在中学实验教学中，严格按照教材实验的配方和步骤操作，实验结果并不像教材呈现得那么明显。其中，细胞质较易看到红色，但细胞核区域并没有出现教材呈现的绿色，而是呈现蓝色或蓝绿色。

查阅文献发现，甲基绿和吡罗红混合染液染色的原理主要有两个方面：①染色与聚合程度有关，甲基绿与聚合程度高的DNA优先结合呈绿色，吡罗红优先与RNA结合呈红色；②甲基绿和吡罗红在水中电离后都带正电荷，但甲基绿碱性较吡罗红要强，甲基绿易与细胞核极性吸附而染色，吡罗红易与细胞质吸附结合。因此，pH过低甲基绿染色效果差；pH过高吡罗红染色效果不良[1，2]。由染色原理可知，pH对染色结果有影响，考虑到不同材料细胞内pH可能存在差别，不同的材料对染色效果可能也存在差别。在以下探究实验中，为了不改变pH，省略了盐酸水解这一步骤。

1 实验材料

1.1 试剂 取吡罗红甲基绿粉1 g，加入100 mL蒸馏水中溶解，放入棕色瓶中保存，制成A液。取11.55 mL冰醋酸稀释至1000 mL，制成0.2 mol/L的醋酸溶液；称取27.2 g三水合醋酸钠用水溶解，定容1000 mL，制成0.2 mol/L的醋酸钠溶液，并按表1将醋酸和醋酸钠混合，配置成不同pH的醋酸-醋酸钠缓冲溶液，作为B液。……