蔡鹏程，元文峰，丁 浩△

(1.南昌大学第二附属医院消化内科，南昌 330006；2.乐安县人民医院内二科，江西抚州 344300)



重组质粒pcDNA3.1/C-sis对大鼠FHF的影响

蔡鹏程1，元文峰2，丁 浩1△

(1.南昌大学第二附属医院消化内科，南昌 330006；2.乐安县人民医院内二科，江西抚州 344300)

目的 探讨重组质粒pcDNA3.1/C-sis导入大鼠对暴发性肝功能衰竭(FHF)的影响。方法 利用流体力学的方法将重组质粒pcDNA3.1/C-sis导入大鼠肝脏，48 h后用内毒素(LPS)+D-半乳糖胺(D-GalN)诱导大鼠FHF；利用荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blotting)检测C-sis表达；利用苏木精-伊红(HE)染色及测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性检测凋亡；利用Western Blotting检测Bcl-2和Bax的表达变化；计算大鼠24 h观察期内的死亡率。结果 FHF+C-sis质粒组的C-sis mRNA和蛋白表达水平较正常对照组和FHF+空载质粒组明显增加，差异均有统计学意义(P<0.01)。与正常对照组相比，FHF+林格液注射组和FHF+空载质粒组肝脏细胞凋亡增多；与FHF+空载质粒组相比，FHF+C-sis质粒组肝脏细胞凋亡减少。与正常对照组相比，FHF+林格液注射组大鼠肝脏组织中Caspase-3的表达增多(P<0.01)；与FHF+空载质粒组相比，FHF+C-sis质粒组大鼠肝脏组织中Caspase-3的表达减少(P<0.05)。与正常对照组相比，FHF+林格液注射组大鼠肝脏组织中Bcl-2表达明显减少(P<0.01)，Bax表达明显增多(P<0.01)；而与FHF+空载质粒组相比，FHF+C-sis质粒组大鼠肝脏组织中Bcl-2表达增多(P<0.05)，Bax表达减少(P<0.05)。在24 h观察期内，正常对照组大鼠均存活，FHF+林格液注射组及FHF+空载质粒组大鼠死亡率分别为70.0%和80.0%；而FHF+C-sis质粒组大鼠仅20.0%死亡。结论 C-sis基因可减弱LPS+D-GalN诱导的大鼠FHF。

原癌基因蛋白质C-sis；重组质粒；大鼠；肝功能衰竭，急性

原癌基因参与调控细胞的正常分裂、增殖、成熟及分化过程，以及组织稳态维持过程的调控[1]。因此，原癌基因对细胞的正常生长及组织修复具有关键性作用。而原癌基因C-sis是血小板源生长因子B链(platelet-derived growth factor B chain，PDGF-B)的编码基因[2]，它具有促进细胞增殖及抑制细胞凋亡的作用，并能增强组织修复功能[3]。暴发性肝功能衰竭(fulminating hepatic failure，FHF)是以急性严重肝损伤为特征的一种临床综合征[4]，缺乏有效的治疗手段，病死率很高。所以，需研究其他治疗FHF的有效方法。笔者假设C-sis能在受损肝脏组织的修复及FHF的治疗中发挥积极作用。为此，本研究将C-sis基因导入大鼠肝脏，并用内毒素(LPS)+D-半乳糖胺(D-GalN)诱导大鼠建立FHF模型，检测大鼠肝脏的凋亡情况，且计算大鼠死亡率，以探索C-sis是否可以成为FHF治疗的分子作用靶点，为治疗FHF提供新的思路或切入点。……