刘文文， 陈裕庆， 张文敏， 高美钦，2



萘酚AS-TR磷酸酯法酸性磷酸酶染色在肌病诊断中的应用

刘文文1， 陈裕庆1， 张文敏1， 高美钦1，2

萘酚AS-TR磷酸酯； 酸性磷酸酶； 酶组织化学； 肌疾病

酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)主要位于机体各组织中的溶酶体内，吞噬细胞胞质内也含有丰富的ACP。此酶在酸性条件下催化醇和酚类磷酸酯的水解，最适合的pH为4.8～5.2。显示ACP的常用方法有Leder and Stutt改良萘酚AS-TR磷酸酯法与Holtgn Bitensky改良磷酸铅法。现笔者选用改良萘酚AS-TR磷酸酯法应用于骨骼肌活检标本的病理诊断中，效果满意，值得推广应用，现报告如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 收集2014-2016年临床送检的骨骼肌活检组织共400例，选取其中有代表性的3例。例1为男性，60岁，病理诊断“未见明显特异性改变”；例2为女性，21岁，病理诊断“多发性肌炎”；例3为女性，26岁，病理诊断“糖原累积性肌病”。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器和试剂 酸度计(含数字式)(PHS-3C，上海第二分析仪器厂)；恒冷切片机(HM 550 OMVPD，美康国际有限公司)；磁力加热搅拌器(78型，上海市南汇电讯器材厂)。试剂：OCT冰冻切片包埋剂(1603966，德国Leica公司)；异戊烷(14090414)、亚硝酸钠(20160918)、对品红(F20111207)及二甲基甲酰胺(T20160913)(国药集团化学试剂有限公司)；巴比妥钠(Z6306，成都西亚化工股份有限公司)；醋酸(160223)及盐酸(150131)(上海西陇化工股份有限公司)；萘酚AS-TR磷酸酯(117K5308V，美国Sigma公司)。

1.2.2 配制试剂 参照文献[1]的方法配制试剂。4%对品红盐酸溶液：对品红1 g，2 mol/L盐酸加至25 mL，混合后轻轻摇动使对品红完全溶解，第2天过滤后使用。4%亚硝酸钠溶液：亚硝酸钠40 mg，蒸馏水加至1 mL，每次临用时配制。六偶氮对品红溶液：4%对品红盐酸溶液6滴，4%亚硝酸钠溶液1 mL，Michaelis巴比妥醋酸盐缓冲液(pH=7.6)30 mL。……