Exendin-4改善氧化应激减轻t-BHP诱导的HUVECs凋亡

2017-08-07王林曦刘小莺刘晓红刘礼斌

福建医科大学学报 2017年2期

吴莉，王林曦，2，刘小莺，刘晓红，陈洲，刘礼斌

吴莉1，王林曦1，2，刘小莺1，刘晓红1，陈洲3，刘礼斌1

目的探讨Exendin-4对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法在原代培养的HUVECs中，采用t-BHP(100 μmol/L)干预4 h，加用或不加用Exendin-4(100 nmol/L)预处理细胞24 h，分为：对照组(A组)、t-BHP处理组(B组)、Exendin-4处理组(C组)及Exendin-4+t-BHP组(D组)。应用MTT比色法检测细胞存活率，DAPI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率，活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS的产生。结果与A组比较，100 μmol/L t-BHP作用4 h，B组的HUVECs存活率下降40%(P<0.001)；DAPI染色荧光显微镜观察证实，t-BHP可以诱导HUVECs凋亡；加用Exendin-4预处理细胞24 h，D组的HUVECs存活率较B组增高(P<0.01)。DAPI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率提示，与B组比较，Exendin-4预处理可使D组的细胞凋亡率减少44%(P<0.05)，并减少ROS的产生(P<0.05)。结论 t-BHP能够诱导HUVECs凋亡，Exendin-4可减少t-BHP诱导的HUVECs凋亡。

过氧化氢；内皮, 血管/细胞学；脐静脉/细胞学；肽类；毒液类；细胞凋亡；氧化性应激

糖尿病大血管并发症的病理基础是动脉粥样硬化性改变。研究表明，糖尿病患者体内氧化应激水平增高，过强的氧化应激会诱导内皮细胞凋亡，是动脉粥样硬化起始和进展的重要因素[1-2]。抑制过强氧化应激所诱导的内皮细胞凋亡可作为糖尿病血管病变防治措施的新靶点。

第三丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide, t-BHP)是过氧化氢的类似物，化学性质稳定，是体外研究氧化应激的常用物质。本课题组前期研究阐明t-BHP可诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)凋亡[3]。胰升糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)是一种肠促胰岛素，除有效降低血糖外，还有多种生理功能。Gaspari等研究发现，GLP-1受体激动剂可保护内皮功能，抑制ApoE(-/-)小鼠动脉粥样斑块的形成。Exendin-4是GLP-1受体激动剂[4]。本实验拟在原代培养的HUVECs中观察Exendin-4对t-BHP诱导内皮细胞凋亡的影响，为糖尿病大血管并发症的防护提供必要的实验依据。