江卫红,范世珍,莫 莉,黄炳坤

(深圳市福田区中医院,广东 深圳518034)

深圳市福田区18749例妇女宫颈人乳头瘤病毒分型检测结果的分析

江卫红,范世珍,莫 莉,黄炳坤

(深圳市福田区中医院,广东 深圳518034)

目的 分析2011年至2015年18749例妇女生殖道人乳头瘤病毒(Human Papilloma Virus,HPV)分型检测结果。方法 对在深圳市福田区居住的18749例妇女采用PCR+膜杂交法HPV分型检测，共21型，其中14种高危型人乳头瘤病毒(High Risk Human Papilloma Virus,HR-HPV)及7种低危型人乳头瘤病毒(Low Risk Human Papilloma Virus,LR-HPV)，并按年龄段进行分析。结果 HPV总感染率为18.35%，LR-HPV感染率为6.32%，HR-HPV感染率为14.36%。前3位LR-HPV亚型为CP8304型、53型和6型，3者在LR-HPV感染人群中构成比共占78.35%。前3位HR-HPV亚型为52型、16型、58型，3者在HR-HPV感染人群中构成比共占50.54%。经年龄标化，35-54岁此年龄段HR-HPV感染率最低，为12.10%-12.51%，16-34岁HR-HPV感染率最高，55-80岁HR-HPV感染率较35-54岁有所升高，此3年龄段之间HR-HPV感染率比较，差异有统计学意义(P<0.01)。HPV多重基因亚型混合感染发生率以16-19岁最高，约14.55%；其次为20-29岁和55-64岁，约4%水平；最低为30-54岁和65-80岁，为2%水平。多重基因混合感染中多以高危型基因联合其他基因型感染为主，混合型感染中HPV亚型前10名排序：52、CP8304、53、58、16、39、51、33、6、18型。结论 深圳市福田区35-54岁HR-HPV感染率较稳定，为12.10%-12.51%，最能代表人群感染水平。常见HR-HPV亚型前3位为52、16、58， HPV18 不占主导地位。低年龄组的HPV感染率和多重基因亚型混合感染率高，而多重基因混合感染中以HR-HPV亚型联合其他基因型感染为主。

人乳头状瘤病毒；分型检测；感染率

(ChinJLabDiagn,2017,21:1201)

宫颈癌居全球妇女常见恶性肿瘤的第3位，目前已公认HPV感染是宫颈癌的主要病因[1]。HPV亚型众多，目前已发现200多种，每种亚型致病力和分布都不同。在世界不同地区，HPV感染率及亚型分布存在显著的差异[2]，了解其流行病学特征，可对今后各个地区制定宫颈癌筛查策略以及研发应用HPV疫苗具有重大的意义。深圳市是沿海地区，是中国的经济特区，是个移民城市，人口众多，组成复杂。本文对深圳市福田区18749例妇女HPV分型检测结果进行分析，以期为本地区的宫颈癌防治工作提供数据。

1 资料与方法

1.1 资料

选取2011年1月至2015年12月，对在深圳市福田区居住的18749例妇女以免费筛查、门诊机会性筛查、体检、妇科住院手术患者术前筛查方式进行HPV分型检测，无子宫及宫颈手术史、目前非妊娠、无骨盆放疗史，2年内未进行过宫颈癌筛查者。

1.2 方法

由我院妇科门诊、住院部、体检科临床工作5年以上的人员进行妇科检查及采集标本工作，进行HPV DNA检测。

PCR+膜杂交法HPV亚型检测：先用PCR法检测样本中是否有可倍增的HPV DNA，再采用膜杂交法对21种HPV亚型(14种高危型16、18、31、33、35、39、45、51、52，56、58，59、66、68；7种低危型6，11、42、43、44、53、CP8304)进行检测。试剂来源于广东省凯普生物化学有限公司，检测过程按产品说明书进行。

1.3 统计学方法

应用SPSS 19.0软件进行统计学分析。以感染率描述HPV及HR-HPV、LR-HPV的感染情况,同时计算各年龄段中HPV及HR-HPV、LR-HPV的感染率。计数资料比较采用χ2检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 HPV亚型感染状况

18749例妇女中，检测的21种 HPV基因亚型均被检出。14种HR-HPV亚型感染率顺位见表1。HPV感染及多重基因混合感染情况见表2。

不论单一亚型或混合亚型感染，LR-HPV前3型为CP8304、53型和6型，3者在LR-HPV感染人群中构成比共占78.35%(1024/1307)。HPV52、HPV16型和HPV58型为深圳市福田区最常见的3种HR-HPV亚型，3者在HR-HPV感染人群中构成比共占50.54%(1670/3304)。多基因混合感染中多以高危型基因联合其他基因型感染为主，混合型感染中HPV亚型前10名排序：52、CP8304、53、58、16、39、51、33、6、18。

表1 深圳市福田区14种HR-HPV亚型感染率

表2 HPV感染及多重基因混合感染情况

2.2 HPV亚型的年龄分布状况

18749例妇女中，年龄范围16-80岁，平均年龄(39.2±10.5)岁，分为11个年龄段：16-19岁、20-24岁、25-29岁、30-34岁、35-39岁、40-44岁、45-49岁、50-54岁、55-59岁、60-64岁、65-80岁。HPV感染率及各亚型感染率按年龄段标化，见图1及表3。从图表可看出，年龄标化HPV感染率与年龄标化HR-HPV变化一致，各年龄组HR-HPV感染率经统计学比较，16-、20-两年龄组相当，高达22%以上，16-、20-、25-、30-、35-各年龄组间有显著差异(P<0.01),且呈直线下降趋势，降至12%左右；而35-至50-各年龄组间无显著差异(P>0.05),基本稳定在12%左右；55-以上3个年龄组感染率又有所上升，约16%(P<0.01),但低于16-、20-组的22%(P<0.01)。可见HR-HPV感染在30岁前年轻妇女中最高，35-54岁HR-HPV感染率较稳定，HR-HPV感染率12.10%-12.51%，最能代表人群感染水平。55岁后感染水平有所上升，但仍低于30岁前年轻妇女。各年龄组LR-HPV感染率经统计学比较，16-、20-、25-、30-年龄组依次呈逐渐下降趋势，有显著性差异(P<0.01);30-岁及以后各组稳定在6%左右较低水平，各年龄组间比较无显著差异(P>0.05)。说明30岁以前LR-HPV感染率最高，30岁下降，稳定在6%左右较低水平。另外，不同年龄组 HPV 多重基因亚型混合感染经统计学比较分为3个感染水平年龄段：16-岁最高，约14.55%；其次为20-、25-和55-、60-岁四组，约4%水平；最低为其他各年龄组，为2%水平。三个水平混合感染比较有显著性差异(P<0.01)。

图1 深圳市福田区不同年龄段妇女HPV感染率

总体16⁃19(%)20⁃24(%)25⁃29(%)30⁃34(%)35⁃39(%)40⁃44(%)45⁃49(%)50⁃54(%)55⁃59(%)60⁃64(%)65⁃80(%)HPV感染率(%)18．3529．0928．9423．62I18．9316．4416．4115．8617．5119．5617．2118．97LR⁃HPV感染率(%)6．3218．1810．508．766．235．506．056．297．506．736．884．50HR⁃HPV感染率(%)14．3625．5022．6018．0614．6812．5111．2411．3512．1016．9014．1516．40

3 讨论

3.1 HPV亚型的地区分布特点

宫颈癌是严重威胁全球妇女生命健康的恶性肿瘤，已证实HPV的持续感染是导致宫颈癌的主要病因[1]。目前已发现的200多种HPV型别约有40种型别与生殖道感染有关。可致宫颈癌及其癌前病变被称为HR-HPV，多与生殖道湿疣等良性病变有关被称为LR-HPV[3]。在全球范围内，HPV16和HPV18的感染可导致将近70%的宫颈癌[4]，而HPV6和HPV11的感染可导致将近90%的生殖器疣[5]。

在中国，总体上较易感的HPV型别依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV33、HPV52、HPV31、HPV45、HPV9、HPV6和HPV35。其中，又以HPV 16为主，感染率为58.7%，而HPV18和HPV58是除HPV16型以外最常见的两个型别[6]。流行病学调查研究表明，不同的HPV型别的感染存在明显的地域性差异，不同地区的HPV易感型别不同[2]且不同型别可引起的疾病及致病程度各不相同[7]。我国地域辽阔，不同民族和地区甚至同一个省的不同城市之间HPV的流行情况也存在着较大的差异[8-10]。

本研究结果发现，深圳市福田区HR-HPV前三位亚型为52、16、58，3者在高危型感染人群中构成比共占50.54%。LR-HPV前三位为CP8304、53、6型，3者在LR-HPV感染人群中构成比共占78.35%。本研究HR-HPV前3位亚型与王月云[11]报道的深圳市前3位HR-HPV亚型为HPV16、52、58相同，只是16和52型顺位改变。Bao等[12]对亚洲的HPV亚型研究并进行荟萃分析后发现，亚洲最常见的HPV亚型为16、58、33、52和18型。国内对HPV感染高发地区山西省的调查发现该地区HPV优势亚型为16、58、52、33和18型[13]， Chan等[14]对香港地区妇女的调查显示，HPV感染优势亚型为16、58、11、CP8304、33和18型。由此可见，本研究结果符合亚洲地区前3位HR-HPV亚型为16、HPV52、HPV58，只是顺序变为HPV52、HPV16、HPV58。LR-HPV前3位为HPV-CP8304、53型、6型占优势的分布特点。

本研究人群 HPV总感染率为18.35%，LR-HPV感染率为6.32%，HR-HPV感染率为14.36%。HR-HPV感染率与我国报道的HPV 阳性感染率[15]基本相近，但低于山西襄垣[13],高于国外有关文献报道[16，17]，感染率的不同可能与检测方法，地域、人群和种族，经济状态及卫生条件存在差异有关。

3.2 HPV亚型的年龄分布特点

年龄是宫颈癌和HPV感染的相关因素[18]。有研究显示，HPV在年轻妇女中感染率最高，其后，随年龄增长而逐渐下降[19]。

本研究结果显示，年龄标化HPV感染率与年龄标化HR-HPV感染率变化一致，HR-HPV感染率显示三个年龄段水平：在30岁前年轻妇女中最高；35-54岁较稳定，HR-HPV感染率12.10%-12.51%，最能代表人群感染水平；55岁后感染水平有所上升，但仍低于30岁前年轻妇女。LR-HPV感染率30岁以前最高，30岁后下降，稳定在6%左右较低水平。可能原因：①检测的型别少；②LR-HPV致病力低，结构上不易整合至宿主细胞，易清除；③30岁后妇女对LR-HPV产生了一定的免疫力。

本研究结果与De Sanjose[19]等荟萃分析结果相似，只是年龄段稍有所区别，其分析结果为HPV感染率在<35岁的年轻妇女中最高，并随年龄增加而降低；在非洲、欧洲、美国等部分地区，>55岁的妇女中，存在HPV的第2个感染高峰。本研究结果也提示>55岁老年妇女HR-HPV感染率有所增高，且有统计学意义。发生原因目前尚不清楚。可能有以下几方面原因：①在中老年妇女中，可能由于绝经后体内雌激素水平的急剧变化以及自身免疫能力的下降等，导致了机体清除HPV能力受损或抑制潜伏感染复发的能力下降，从而导致HPV感染高发。②该年龄段妇女性生活习惯的改变；③区域性或种族性的特殊表现。Castle等[20]的研究结果显示，年龄>45岁的妇女中，HPV的持续感染远大于新发HPV感染，因此，中老年妇女HPV感染率高也可能是由于HPV的持续感染或潜伏感染的复发所造成的。总之，出现感染高峰的两个年龄段应引起重视。

3.3 HPV混合感染情况

HPV的多重基因亚型混合感染并不少见。但有关研究报道的比例不尽相同，这与研究的人群、地域和检测方法不同有关[21]。

该组研究资料中，18749例妇女中混合感染情况：总的混合感染率4.55%，低于王月云[11]报道的深圳市混合感染率12.2%。不同年龄组 HPV 多重基因亚型混合感染发生率经统计学比较分为3个感染水平年龄段：16-19岁最高，约14.55%；其次为20-29岁和55-64岁，约4%水平；最低为其他年龄段，约2%水平。LR-HPV混合感染率0.29%，HR-HPV混合感染率1.93%，HR-HPV+LR-HPV混合感染2.33%。多基因混合型感染中HPV亚型前10名排序：52、CP8304、53、58、16、39、51、33、6、18。HPV52亚型在多重亚型混合感染中占有最高优势比例，应该引起足够的重视。本研究人群显示混合感染中多以高危型基因联合其他基因型感染为主，无疑对HPV预防性疫苗的研制和有效应用提出了更高的要求。

HPV亚型在女性人群中的分布是子宫颈癌防治中的热点问题之一，涉及子宫颈癌及癌前病变的筛查，对子宫颈癌预防性疫苗的研究与应用有直接影响。本研究结果对本地区新一代疫苗研制应用和子宫颈癌的防治工作有着十分重要的意义。

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Analysis on the Detection Results of Cervical Papilloma Virus in 18749 Cases of Futian District,Shenzhen City

JIANGWei-hong,FANShi-zhen,MOLi,etal.

(FutianDistrictHospitalofTraditionalChineseMedicine,Shenzhen,Guangdong518034,China)

Objective To analyze the results of genotyping test of human papilloma virus (HPV) in 18749 women from 2011 to 2015.Methods A total of 18749 women who were residing in Futian District of Shenzhen were tested by PCR + membrane hybridization with HPV typing.Among them,14 were high risk human papilloma virus (HR-HPV) and 7 were low risk human papilloma virus (LR-HPV) ，and analyzed the result by age group.Results The total infection rate of HPV was 18.35%,the infection rate of LR-HPV was 6.32%,and the rate of HR-HPV infection was 14.36%.The first three LR-HPV subtypes were CP8304,53 and 6,and the three group accounted for 78.35% in the LR-HPV population.The first three HR-HPV subtypes were type 52,type 16,type 58,the three HR-HPV subgroups in the HR-HPV population assumed to 50.54%.The infection rate of HR-HPV was the lowest at the age of 35-54 years old,which was 12.10% -12.51%.The infection rate of HR-HPV between the three age groups (16-34,35-54 and 55-80)was statistically significant (P<0.01).The incidence of HPV multiple subtypes of mixed infection was highest at 16-19 years,about 14.55%;followed by 20-29 years old and 55-64 years old,about 4% level; the lowest was 30-54 years old and 65-80 years old,is 2%.In addition,the infection with HR-HPV subtypes combined with other subtypes is predominant in mixed infection of multiple genes.The top 10 subtype in the mixed HPV infection were:52,CP8304,53,58,16,39,51,33 ,6,18 type.Conclusion The infection rate of HR-HPV in 35-54 years old in Futian District,Shenzhen is 12.10% -12.51%,which is the most representative of the population infection level.HR-HPV subtype of the first three were 52,16,58,HPV18 is not dominant.The infection rate of HPV infection and multiple subtypes were higher in the low age group.In addition,the infection with HR-HPV subtypes combined with other subtypes is predominant in mixed infection of multiple genes.

human papilloma virus; typing detection; infection rate

1007-4287(2017)07-1201-05

R737.33

A

江卫红(1970-)，女，硕士学位，副主任医师,主攻方向：宫颈病变。

2016-06-14)