范三红,田贺贺,柴利萍,刘欢欢,李 晨

(山西大学生命科学学院,山西太原 030006)



响应面法优化藜麦种皮过氧化物酶固定化条件

范三红,田贺贺,柴利萍,刘欢欢,李 晨*

(山西大学生命科学学院,山西太原 030006)

以从藜麦种皮中提取的过氧化物酶为原材料,利用0.2%聚乙烯醇-3%海藻酸钠(PVA-CA)为载体,CaCl2溶液作固定剂,采用包埋法对藜麦种皮过氧化物酶进行固定。在单因素实验的基础上,利用响应面分析法对藜麦种皮过氧化酶固定化的影响因素进行了优化。优化后得到的最佳固定化条件如下:氯化钙浓度为7%,固定化时间为26 min,载体与酶液的比例为1.25∶1(mL/mL),在此条件下实际测得固定化酶的活性为416.5 U。实测值与理论值(417.4U)相差较小,充分验证了所建模型的可靠性。

藜麦种皮,过氧化物酶,响应面法,固定化

过氧化物酶(Peroxidase,POD)在植物界广泛存在,参与生物体中许多重要的生物反应,发挥着重要功能。例如参与植物体内防御反应[1]、分解吲哚乙酸[2]、合成木质素等[3]。由于POD来源广泛,性质相对稳定,对某些有机溶剂亦不敏感,POD作为标记酶广泛用于免疫印迹、酶联免疫及电镜等生物技术。如今,人们逐渐研究出POD的新用途,如在合成燃料中可用作脱色剂[4]、制作新型生物传感器[5]、处理酚类废水[6]等。

固定化酶是指通过物理吸附、包埋或化学结合、交联等方法将酶与不溶于水的目标载体相结合,从而将酶固定在载体上的过程。固定化的酶稳定性普遍高于游离酶,且可以重复使用,酶制剂的价格一般较化学催化剂高昂,重复使用的固定化酶有利于节约生产成本,同时将酶限定在一定的空间内,可以方便的将酶与反应液分离,有利于简化催化工艺,提高产品的纯度和生产效率[7]。……