胡国章， 刘方方， 方 威， 范 佳

敲除let-7a减轻脑缺血再灌注后炎症反应和神经损伤

胡国章1， 刘方方2， 方 威1， 范 佳3

目的 研究微小RNA let-7a在脑缺血再灌注后神经损伤中的作用及机制。方法 将大鼠分为假手术组、对照组、anti-let-7a组和GFP组，每组各12只大鼠，假手术组大鼠为假手术组。对照组、anti-let-7a组和GFP组分别经尾静脉给予生理盐水、表达anti-let-7a的AAV-9质粒或者对照空质粒实验，然后通过线栓法建立脑缺血再灌注大鼠模型。模型建立24 h后，TTC法检测梗死体积，tunel法检测细胞凋亡，Western blot检测caspase-3表达，ELISA和qRT-PCR检测脑组织中TNF-α和IL-6 的表达。并通过Western blot、qRT-PCR和荧光报告基因验证let-7a对MKP1表达的调控。结果 anti-let-7a组大鼠脑梗死体积明显小于GFP组和对照组，脑组织内凋亡细胞数、caspase-3、TNF-α和IL-6 的表达明显低于GFP组和对照组。let-7a可与MKP1 mRNA 3’UTR端结合，下调MKP1在PC12细胞中的蛋白表达。结论 敲除let-7a可通过调控MKP1表达，抑制MAPK信号通路的激活从而减轻脑缺血再灌注后的炎症反应和细胞凋亡发挥神经保护作用。

脑缺血再灌注； let-7； 凋亡； 炎症； 小胶质细胞

研究发现，脑缺血区域的血流再通后可能会导致进一步的组织损伤和功能障碍，这种有害情况被称为脑缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注损伤的具体机制不明，大量的实验表明炎症反应在脑缺血再灌注损伤中起到重要的作用。因此，怎样抑制脑缺血再灌注损伤后炎症反应具有非常重要的临床意义，有望成为缺血性脑血管病的治疗途径。MicroRNA (miRNA)是一类仅有18～25个核苷酸的单链组成的一种小分子非编码RNA，广泛存在于真核生物中，在细胞的凋亡、肿瘤的形成以及病毒的复制过程等多方面发挥着多元化调控作用[1,2]。……