曾 静， 李丹丹， 赵弘轶， 黄勇华， 张微微， 迟丽屹

eNOS解偶联对大脑中动脉栓塞后大鼠神经血管单元的作用及机制

曾 静1， 李丹丹2， 赵弘轶2， 黄勇华2， 张微微2， 迟丽屹3

目的 探讨大鼠大脑中动脉栓塞模型中，内皮型一氧化氮合酶(eNOS)解偶联对神经血管单元的作用及机制。方法 将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=40)和大脑中动脉栓塞(MCAO)组(n=40)。参照Longa法制作MCAO模型。栓塞后6 h，通过蛋白印记法检测缺血区eNOS不同偶联状态的表达情况及3-硝基酪氨酸(3-NT)的水平；通过尼氏染色比较缺血区神经元的形态及存活情况；通过免疫组织化学染色比较缺血区星形胶质细胞、微血管内皮细胞以及血脑屏障紧密连接对应的标记物GFAP、VWF、Occludin的表达水平；通过MRI的T2加权序列和动脉自旋标记(ASL)反应栓塞后脑组织病灶范围及血流情况。结果 MCAO后栓塞部位在T2序列上呈高信号，在ASL序列上血流信号减低。eNOS二聚体/单体的比例明显低于假手术组(P<0.05)；3-NT的含量明显高于假手术组(P<0.05)。尼氏染色显示MCAO后神经元大量空泡形成，核固缩变性，数量显著减少；免疫组化结果显示，VWF、Occludin的表达较假手术组明显减少，而GFAP则明显增多(P<0.05)。结论 MCAO会导致eNOS解偶联。eNOS解偶联后NO合成受限，而具有毒性作用的3-NT产生增多，炎症反应加重，从而对神经血管单元结构及功能产生破坏作用。

神经血管单元； 内皮型一氧化氮合酶； 3-硝基酪氨酸； 动脉自旋标记

脑卒中是全球范围内第二大致死性疾病[1],在卒中发病的类型中，87%为缺血性卒中[2]。近30年来,针对缺血性卒中发生后脑细胞不可逆损伤的机制出现了大量的研究,重点探讨了导致神经元死亡的原因以及使神经元抵御死亡的策略。总结过往脑卒中治疗的得失，孤立地讨论卒中发病过程中神经元细胞病理生理变化，局限地研究某种治疗方案对神经元细胞的保护所用效果，所得的结果往往与临床所见大相径庭[3]。……