陈丽+马书玉

（牡丹江友搏药业有限责任公司）

摘 要：目的：结合文献方法及中美药典方法，通过方法学研究，建立可操作性更强的测定阿立哌唑片有效阿立哌唑含量的分析方法。方法：高效液相色谱法。色谱柱为ODS-A色谱柱（46mm×25cm，5？滋m）；流动相A为：乙腈和0.05%三氟乙酸（10：90），流动性B为乙腈和0.05%三氟乙酸（90：10），进行梯度洗脱；流速：1.2ml/min，进样量：20μl，紫外检测器波长设为254nm；色谱柱柱温设为35℃。结果：有效成分阿立哌唑进样量在0.5186～5.1860μg与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999），加样回收率为100.47%，RSD为1.08%；结论：本方法测定阿立哌唑片含量准确、重复性较好，可操作性及方便性由于现药典方法，可以成为阿立哌唑片含量测定方法。

关键词：阿立哌唑片；高效液相色谱法；含量测定

阿立哌唑是一种新型的非典型抗精神分裂症药物，对DA能神经系统具有双向调节作用，是DA递质的稳定剂。与D2、D3、5-HT1A和5-HT2A受体有很高的亲和力。通过对D2和5-HT1A受体的部分激动作用及对5-HT2A受体的拮抗作用来产生抗精神分裂症作用的。用于治疗各类型的精神分裂症。可作为重性抑郁障碍，抽动障碍和与自闭症相关的烦躁的附加治疗。国外临床试验表明，对精神分裂症的阳性和阴性症状均有明显疗效，也能改善伴发的情感症状，降低精神分裂症的复发率。

本文参考了国内外多篇文献及欧美药典标准，最终建立了适宜仿制制剂的，可靠稳定的阿立哌唑定量方法。

1 仪器与材料

高效液相色谱仪：Thermo UltiMate3000型，电子分析天平：梅特勒XS205。阿立哌唑对照品 （批号 100776-200501）由中国药品生物制品检定所提供。流动相用乙腈为色谱纯；三氟乙酸为分析纯；水为超纯水；样品为公司自制阿立哌唑片。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1]：

色谱柱：Inertsil ODS-A（46mm×25cm，5？滋m）；柱温：35℃

流动相：流动相A为：乙腈和0.05%三氟乙酸（10：90），流动性B为乙腈和0.05%三氟乙酸（90：10）。梯度洗脱配比情况如下：0至2min流动相A：80%；2至10min流动相A：80%→65%；10至20min流动相A：65%→10%；20至25min流动相A：10%；25至26min流动相A：10%→80%；26至35min流动相A：80%。

波长：254nm

流速：1.2ml/min，进样量：20μl

2.2 稀释剂、对照品储备液与对照品溶液的制备

稀释剂：乙腈：甲醇：水：乙酸 （30：10：60：1）

对照品储备液：称取阿立哌唑对照品103.72mg，置100mL量瓶中，并记录，加入稀释剂使溶解并定容至刻度，制得1mg/ml的对照品储备液，并注意避光保存。精密量取上述储备液对照品1ml置10ml容量瓶中，加稀释剂至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

2.3 供試品溶液制备：取阿立哌唑片10片，研细，精密称取约相当于阿立哌唑10mg的粉末，置100mL容量瓶中，加入稀释剂适量，超声处理10分钟，放冷，加稀释剂至刻度后，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

依照2.1项色谱条件进行测定。

2.4 方法学验证

2.4.1 线性关系考察

精密量取2.2项下的对照品溶液储备液0.25ml，0.5ml，1ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml置10ml容量瓶中，分别加稀释剂溶解至刻度，摇匀，制成25，50，100，150，200，250μg/ml的线性关系考察用对照品溶液。按2.1色谱条件进行测定并记录色谱图，以峰面积A为纵坐标，以对照品溶液浓度C为横坐标，制得标准曲线，计算回归方程：A=0.3428C+0.3127 r=0.9999。结果：阿立哌唑浓度在25.93～259.30μg/ml（进样体积20μl），即进样量在0.5186～5.1860μg范围内，线性关系良好。

2.4.2 精密度试验

精密量取2.2项下阿立哌唑对照品溶液依照上述色谱条件连续进样6针，每针20μl，记录色谱图，以峰面积A为考察指标，计算相对标准偏差RSD值，应小于2%。试验结果见表2。

结果：阿立哌唑对照品溶液连续进样6次，峰面积相对标准偏差RSD值小于2%，表明精密度良好。

2.4.3 重复性试验

按照2.3项下供试品溶液制备方法，取同一批次阿立哌唑片样品（规格10mg）平行制备6份供试品溶液，取对照品溶液及供试品溶液各20μl分别进样，记录色谱图，外标一点法，计算阿立哌唑的含量，结果：6份平行样品的阿立哌唑含量RSD值为0.92%，低于于2%表明供试品处理方法可靠稳定。

2.4.4 回收率试验

取阿立哌唑片10片，研细，精密称取约相当于阿立哌唑5mg的粉末9份，分别置100mL容量瓶中，加入阿立哌唑对照品储备液溶液4ml，5ml，6ml各三份，再加入稀释剂适量，超声处理10分钟，放冷，加稀释剂至稀释刻度后，摇匀，滤过，作为供回收率试验用的供试品溶液。经过0.45μm滤膜，分别精密量取本项下供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，外标法计算含量和加样回收率。结果：低浓度回收率分别为：101.69%、99.58%、101.14%，平均回收率100.80%；中浓度回收率分别为：99.07%、101.93%、99.19%，平均回收率100.06%；高浓度回收率分别为：99.94%、99.93%、101.77%，平均回收率100.55%。三个浓度9个供试品回收率数据的平均值为100.47，RSD为1.08%。

结论：阿立哌唑的加样回收率在99.07%～101.93%之间，三个浓度9个供试品回收率数据的平均值为100.47，RSD为1.08%，表明该方法准确可靠。

2.5 样品测定

采用上述建立的方法对公司自制的四批阿立哌唑片样品的含量进行测定，以通过实际测定进一步证明方法可行性。四批阿立哌唑片样品的含量测定结果分别为：10.02mg/片、10.03mg/片、10.01mg/片、9.99mg/片。符合含量要求。表检验方法可靠。

3 讨论

本文旨在建立可测定阿立哌唑片有效成份阿立哌唑含量的分析方法。在试验前对中国药典方法和美国药典方法进行了比较。通过方法学对比试验，认为美国药典色谱条件更加可靠。首先，阿立哌唑不稳定，在色谱流动相系中美国药典为三氟乙酸可能对阿立哌唑有保护作用或是改善分离效果。另外，阿立哌唑见光不稳定，需要注意避光操作。再有，美国药典色谱柱为ODS-A，，中国药典并未强调使用ODS，只说明填料为十八烷基键合硅胶。实际上，普通十八烷基键合硅胶柱与ODS（美国药典L1）还是有一定区别的。本次试验依据美国药典的方法制定，通过试验证明该方法可以用于阿立哌唑片有效成份阿立哌唑含量的测定。

参考文献

[1]美国药典.USP38-NF33 S2.