张京京，阮奔放

(浙江工业大学 绿色制药协同创新中心，浙江 杭州 310014)

新型细胞活力检测EZMTT法的研究

张京京，阮奔放

(浙江工业大学 绿色制药协同创新中心，浙江 杭州 310014)

研究四氮唑盐/甲臜类EZMTT法检测细胞活力和增殖的应用并评价EZMTT法的优势.评价EZMTT法检测细胞增殖的准确性，对比EZMTT法与WST-8的灵敏度、毒性及细胞活力长期跟踪的应用.研究表明：细胞量为3 000～500 000时，在4 h内EZMTT法信号值与细胞量成正比，且较现有产品WST-8检测试剂，EZMTT法更灵敏、毒性更低，可实现长达7 d的细胞活力跟踪.0.06%十二烷基硫酸钠或50 μmol/L盐酸可中止EZMTT反应.EZMTT法有望成为更为优秀的新一代细胞活力检测方法.

EZMTT法；四氮唑盐/甲臜反应；细胞活力检测

细胞活力与增殖检测是细胞学研究不可或缺的一部分.其中四氮唑盐/甲臜类检测试剂[1]较为常用，其原理是通过检测细胞代谢水平，参与NAD(P)+/NAD(P)H氧化还原反应而生成有色甲臜，其检测信号与线粒体活力[2-4]、活细胞量呈正比，可通过酶标仪定量.因EZMTT法操作简便、成本低和准确性较高等优点一直被广泛应用于医疗领域的基础研究[5-6]，尤其是抗癌药物的细胞毒性筛选[7].该类产品主要有MTT，MTS，XTT和WST系列.其中MTT是首批四氮唑盐/甲臜类显色剂，其缺点为操作繁琐[8]，且生成难溶性甲臜可刺穿细胞膜[9]产生细胞毒性.而升级产品XTT，MTS和WST系列产品可带负电荷，可加入电子受体如吩嗪硫酸甲酯(PMS)作为中介转移细胞质或血浆中电子以促进四氮唑反应生成可溶性有色甲臜[10]，其主要优点是无需加入试……