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番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

2017-07-05赵孟雷

实用肿瘤学杂志 2017年3期
关键词:肝癌检测

赵孟雷

番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

赵孟雷

目的 研究番茄红素(Lycopene,LP)对人肝癌HepG2细胞生长的影响并初探其机制。方法 取对数生长期HepG2细胞设空白对照组、LP(5 μg/mL)组、LP(10 μg/mL)组、LP(20 μg/mL)组和顺铂(40 μg/mL)组,每组设10个复孔;各组分别给药干预48 h后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡状况,RT-PCR法检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达,Western blot法检测Caspase-3蛋白表达。结果 与空白对照组比较,经LP(10 μg/mL、20 μg/mL)或顺铂40 μg/mL干预48 h能够显著提高HepG2细胞增殖抑制率,延长细胞周期中G0/G1期而缩短G2/M期,提高细胞凋亡率,上调促凋亡Bax mRNA表达并下调抑凋亡Bcl-2 mRNA表达,提高Bax/Bcl-2比值,上调Caspase-3蛋白表达,LP上述作用具有一定的剂量依赖性。结论 LP具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡的作用,其机制可能与LP干预细胞周期分布和调节凋亡相关基因蛋白表达有关。

番茄红素;肝细胞癌;HepG2细胞;增殖;凋亡

1 材料与方法1.1 细胞、药物与试剂

人肝癌HepG2细胞株由河北医科大学细胞生物研究室惠赠;LP购自南京泽朗生物科技有限公司(批号:20150724,纯度≥96%);顺铂购自江苏豪森药业股份有限公司(规格:6 mL:30 mg);DMEM高糖培养基、胰蛋白酶、胎牛血清购自Gibco公司;Annexin V/PI细胞凋亡试剂盒购自美国BD公司;MTT购自Sigma公司;Caspase-3单抗购自碧云天生物技术有限公司。

1.2 主要仪器

超净工作台(江苏苏净集团有限公司);细胞培养箱(美国Thermo Electron公司);流式细胞仪(美国BD公司);酶标仪(美国BIO-RAD公司);电泳仪和转印泳槽(北京六一仪器厂);RT-PCR(新未来仪器技术有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 细胞培养、分组与给药 人肝癌HepG2细胞株经复苏后植入DMEM高糖培……

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