李培杰, 王 佳,李伟之,马富权,郭雯莹,齐 丽,薛 挥

西安交通大学第一附属医院消化内科(西安 710061)

△通讯作者

人脐血间充质干细胞在大鼠急性肝损伤修复中的作用

李培杰, 王 佳,李伟之,马富权,郭雯莹,齐 丽,薛 挥△

西安交通大学第一附属医院消化内科(西安 710061)

目的：探讨经外周静脉途径移植人脐血间充质干细胞(hUCBMSCs)对急性肝损伤大鼠肝脏功能及组织的修复作用。方法：使用密度梯度离心法结合贴壁培养法体外培养人脐血间充质干细胞。44只雌性SD大鼠随机地分为四组,每组11只：正常组(N组)、单纯移植组(NT组)、损伤组(I组)、移植治疗组(IT组)。I组和IT组在移植前24 h腹腔注射50% CCl4溶液(3 ml/kg)，N组、NT组腹腔注射等量的生理盐水。造模后24 h，使用DAPI标记第3代hUCBMSCs,NT组、IT组大鼠经外周静脉途径移植入(5～6)×106个hUCBMSCs,N组、I组大鼠注入1 ml生理盐水。在造模前、造模后24 h，移植后第3天、第7天、第14天，收集血清检测ALT和AST；移植后第3天、第7天，各组分别处死3只大鼠，第14天处死剩余大鼠，取肝脏组织行病理染色及冰冻切片，观察大鼠肝脏组织的病理学变化以及hUCBMSCs 在肝脏内的迁移定植情况。移植后第14天，取IT组和NT组的肝脏组织进行免疫组织化学染色，检测大鼠肝脏中人源性肝细胞特异性抗原(HSA)的表达。结果：造模后24 h，I组和IT组血清ALT和AST水平明显升高，与N组相比差异有统计学意义(P均<0.05)。与损伤组(I)相比，移植治疗组(IT)的肝脏病理学损伤恢复速度明显加快，移植后第14天接近于正常。无论在移植后的第3天、第7天还是第14天，IT组蓝色荧光标记的细胞数均多于NT组(P均<0.05)。在移植后的第3天，hUCBMSCs主要位于汇管区的周围，第7天和第14天主要定植于肝实质中。移植后第14天，IT组、NT组大鼠的肝组织中均可见红色荧光标记的人源性肝细胞特异性抗原(HSA)，IT组的阳性细胞数(35±7.3)个明显多于NT组(7±3.4)个(t=1.377，P<0.05)。结论：肝脏受损后形成的微环境能够促使hUCBMSCs向受损肝组织中迁移、定植，并诱导其横向分化为肝样细胞来修复肝脏功能及组织。

目前肝移植仍然是治疗急慢性肝脏功能衰竭最为有效的方法，但其广泛应用受到供体肝缺乏、免疫排斥反应以及长期服用免疫抑制剂等方面的限制。近年来,随着再生医学以及干细胞技术的发展,以干细胞为基础的细胞移植治疗为广大急慢性肝功能衰竭患者带来了新曙光。……