柴 婷，任 爽，张燕燕，匡 菁，杨家梅

郑州大学第二附属医院肿瘤科 郑州 450014

抑制自噬对贝伐单抗诱导的结肠癌HCT116细胞凋亡的影响

柴 婷，任 爽，张燕燕，匡 菁，杨家梅#

郑州大学第二附属医院肿瘤科 郑州 450014

#通信作者，女，1965年12月生，硕士，主任医师，研究方向：肿瘤化疗，E-mail：yjm6601@163.com

自噬；贝伐单抗；结肠癌；凋亡

目的：探讨抑制自噬对贝伐单抗诱导的结肠癌HCT116细胞凋亡的影响。方法：用贝伐单抗、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理人结肠癌HCT116细胞48 h，Annexin V-FITC染色、流式细胞术检测细胞凋亡，吖啶橙染色、荧光显微镜观察细胞酸性自噬泡的变化，Western blot法检测细胞内自噬相关蛋白Beclin-1以及凋亡相关蛋白Caspase-9的表达。结果：贝伐单抗作用48 h对HCT116细胞的半数抑制剂量(IC50)为16 mg/L，3-MA的IC50为5 mmol/L。在此浓度下，3-MA单独作用可降低细胞中Beclin-1的表达，贝伐单抗单独作用可增强细胞中Beclin-1的表达，二者联用有拮抗作用(P<0.05)。3-MA和贝伐单抗单独作用均可提高细胞凋亡率(P<0.05)，增强细胞中Caspase-9蛋白的表达(P<0.05)，二者联用有协同作用(P<0.05)。结论：抑制自噬可增强贝伐单抗对结肠癌HCT116细胞的杀伤作用。

贝伐单抗是靶向血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的单克隆抗体，可以明显抑制肿瘤组织新生血管的形成，从而造成旺盛生长的肿瘤细胞的供血不足，导致肿瘤细胞缺血、缺氧[1]。自噬是肿瘤细胞对抗各种抗肿瘤作用的有效手段，通过降解受损的肿瘤细胞细胞器、大分子蛋白质，给肿瘤细胞提供生物合成所需的分子底物，帮

助其应对恶劣的生存环境并维持细胞的稳态。特别是在肿瘤化疗过程中，自噬能够通过隔离并降解被药物破坏的蛋白或细胞器，保护细胞并对抗化疗药物，降低化疗药物的疗效[2-5]。该研究中，作者用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和贝伐单抗单独或联合作用于结肠癌HCT116细胞，观察抑制自噬对贝伐单抗诱导的HCT116细胞凋亡的影响。……