张 妍,韩倩倩,朱艳琴

河南中医药大学基础医学院 郑州 450046

α-细辛醚诱导的Eca-109细胞中cytC、bax的表达*

张 妍,韩倩倩,朱艳琴#

河南中医药大学基础医学院 郑州 450046

#通信作者，女，1956年11月生，硕士，教授，研究方向:中药抗肿瘤，E-mail:jc.zyqin@163.com

α-细辛醚；细胞色素C；bax；Eca-109 细胞

目的：观察α-细辛醚对食管癌Eca-109细胞凋亡及cytC、bax表达的影响，探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法：体外培养人食管癌Eca-109细胞，以15 mmol/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)和25、50、100 mg/L的α-细辛醚干预48 h后，DAPI染色、倒置荧光显微镜下观察细胞形态，MTT检测细胞增殖情况，Annexin V-PI法检测细胞凋亡率，分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测cytC、bax mRNA及蛋白的表达。以无干预细胞作空白对照。结果：与空白对照组比较，α-细辛醚组和5-FU组细胞的增殖能力降低，凋亡率升高(P<0.05)，细胞中cytC、bax蛋白及mRNA相对表达量均升高(P<0.05)。结论：α-细辛醚可能通过上调线粒体通路cytC、bax的表达，抑制Eca-109细胞增殖，促进其凋亡。

食管癌是消化系统常见恶性肿瘤，其发生发展是一个多因素、 多阶段、 多基因变异积累及相互作用的复杂过程[1]。近来研究[2]表明，化疗药物多是通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。线粒体作为细胞凋亡调控的活动中心，可通过开放线粒体通透性转变孔(mitochondrial permeability transition pore，MPTP)促进肿瘤细胞凋亡，因而线粒体途径的凋亡基因调控备受关注。α-细辛醚是天南星科植物石菖蒲挥发油的主要成分，具有镇静、解痉、催眠、抗惊厥等功效[3]。有关α-细辛醚抗肿瘤作用的研究甚少。作者通过观察α-细辛醚对体外培养人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响，检测细胞色素C(cytochrome C，cytC)、bax mRNA和蛋白的表达情况，探讨α-细辛醚诱导Eca-109细胞凋亡的作用靶点及机制，为α-细辛醚的临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器 Eca-109购于南京凯基生物科技发展有限公司。……