李 强，杨成明

(1.重庆市南川区人民医院心内科 408400；2.第三军医大学野战外科研究所大坪医院心内科 400042)

论著·基础研究

原花青素B2保护血管内皮细胞延缓凋亡及机制研究

李 强1，杨成明2△

(1.重庆市南川区人民医院心内科 408400；2.第三军医大学野战外科研究所大坪医院心内科 400042)

目的 以H2O2诱导人内皮细胞凋亡为模型，观察原花青素B2(GSPB2)延缓人内皮细胞凋亡的保护作用及其机制。方法 用0.5 mmol H2O2预处理细胞，分别加入不同浓度的GSPB2(5.0、10.0、20.0 μmol/L)保护细胞，TUNEL法检测细胞凋亡；Western blotting检测凋亡相关分子Caspase-3、Bax、Bcl-2以及影响凋亡的相关分子PI3K、p-Akt、Akt的蛋白表达；Transwell小室检测各组细胞迁移情况。结果 0.5 mmol H2O2致人内皮细胞凋亡明显增加(P<0.01)，GSPB2能明显减轻H2O2所致的人内皮细胞凋亡(P<0.05)，10 μmol/mL的GSPB2就能接近恢复到H2O2未处理的对照组水平。进一步研究发现：Caspase-3、bax蛋白表达上调，Bcl-2表达下调；PI3K、p-Akt、Akt表达上调。结论 不同浓度的GSPB2对H2O2诱导的血管内皮细胞具有保护作用，而且表现为浓度依赖性和时间依赖性，其机制与相关分子PI3K、p-Akt、Akt有关。

原花青素B2；凋亡；血管内皮细胞

心血管疾病的发病率和病死率在所有疾病中是最高的，血管内皮细胞分布广，极易受到多种因素的影响，其中，氧化与抗氧化对弈、凋亡与抗凋亡的矛盾，都发生在血管内皮细胞，进而与心血管疾病相关联。原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSPs)广泛存在于水果、蔬菜、花、坚果、种子和树皮中，是一类多羟基黄烷-3-酚的低聚物，也有以高聚物形式存在的酚类化合物，原花青素与缩合单宁是同系物，是多羟基黄烷-3-酚的寡聚或高聚物，大多以C4→C8键相互连接，也存在C4→C6键连接[1]。具有抗氧化、清除自由基、心血管保护、抗炎、抗血小板聚集、抗肿瘤、调节血脂、抗高血压、抑制细胞增殖、调节免疫、保护肝脏、抑制细胞凋亡以及抗疲劳、改善睡眠等广泛的生物活性,且具有高效、低毒、生物利用度高等特点[2-5]。研究发现：Bax/Bcl-2蛋白和半胱天冬酶-3活化与GSP处理诱导的凋亡现象间有所关联[6]。……