敖炬钢，韩爱玲，钱琦琪，张录顺

大鼠不同器官组织的脱水方法改进

敖炬钢1，韩爱玲2，钱琦琪3，张录顺4

组织脱水；大鼠；制片技术；方法改进

近期，本实验室于大鼠组织病理学实验中发现，若按大鼠常规脱水时间和流程制备大鼠的组织蜡块，则组织切片易碎裂，染色易脱片，造成后续工作无法进行。即便使用防脱片剂效果亦不佳，尚未脱片的组织切片HE染色及特殊染色结果亦不理想。本实验室根据大鼠各个器官组织特点进行试验后，改进了大鼠组织的脱水方法取得较好效果，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料 按实验要求取大鼠各部位组织，大小1.5 cm×1.5 cm，厚0.3～0.5 cm。实验器具：国产脱水机。化学试剂为55%、60%、65%、70%、80%、85%、95%、100%梯度乙醇，二甲苯，石蜡(熔点58～60 ℃)。

1.2 方法 传统处理流程：(1)10%中性福尔马林充分固定2～3 h;(2)75%乙醇90 min；85%乙醇80 min；95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各1 h；100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各1 h;(3)二甲苯Ⅰ20 min；二甲苯Ⅱ 25 min；(4)浸蜡温度58～65 ℃：石蜡Ⅰ、Ⅱ各30 min；石蜡Ⅲ 40 min。改良处理流程：(1)多聚甲醛溶液固定24～48 h;(2)根据不同器官组织的特点，各个器官的脱水步骤及时间详见表1。本实验浸蜡温度为61 ℃。

2 结果

本实验以肝脏组织HE染色为例。肝组织以实质细胞为主，间质细胞较少，肝硬化组织有假小叶形成，其实质细胞与纤维化组织同时存在。由于其组织脆性，若按照常规方法处理，易造成肝组织脆硬，切片时易碎(图1、2)或易产生皱褶折叠(图3)、碎屑污染，影响制片和后续工作。改进脱水方法制得的大鼠组织蜡块，手感柔润，蜡片光润平整。制片染色后镜下可见胞质透彻，胞核清晰，组织结构完整(图4)。切片的连续性、裂痕、褶皱和碎屑程度均优于常规方法。……