马涛，王一侠，金振涛，谷瑞增，鲁军

（中国食品发酵工业研究院北京市蛋白功能肽工程技术研究中心，北京100027）

三文鱼过敏原小清蛋白分离纯化及免疫结构鉴定

马涛，王一侠，金振涛，谷瑞增，鲁军*

（中国食品发酵工业研究院北京市蛋白功能肽工程技术研究中心，北京100027）

小清蛋白是鱼类的主要过敏原，三文鱼小清蛋白具有不同的亚型，分子量相近，序列基本相同，给分离纯化带来了不小的挑战。本试验采用硫酸铵盐析、Qxl-Sepharose离子交换结合凝胶过滤等方法定向纯化小清蛋白β1型，并应用免疫印迹法对纯化的小清蛋白进行过敏原性鉴定，结合激光辅助解析/飞行时间质谱进行结构鉴定。结果显示，硫酸铵盐析、离子交换层析结合凝胶过滤纯化方法可以得到纯度达90%以上的小清蛋白β1型，且蛋白具有很强的免疫反应活性。针对该蛋白的研究不仅有利于过敏原检测方法的建立，也可为低致敏性水产品的开发提供理论依据。

三文鱼；原肌球蛋白；分离纯化；免疫印迹

根据流行病学调查，全世界范围内约有2%的成年人、8%的婴幼儿对食物产生过敏反应，其中90%以上的食物过敏反应由蛋、奶、鱼、甲壳类动物、花生、大豆、坚果和小麦等八大类食物引起[1]。鱼是引起食物过敏的常见水产品之一，其主要过敏原是小清蛋白，一种水溶性钙结合蛋白，分子量大约为12 ku，等电点（pI）为3.9～5.5，能够引起人体由IgE介导的免疫反应[2-3]。相对而言，国内在水产品过敏原的研究起步较晚，目前的研究主要集中在虾、蟹等甲壳类动物，对于鱼类过敏的研究仍然很少[4-5]。……