金葡菌主动外排蛋白QacA α-螺旋1、2及TMS1氨基酸的功能研究*
2016-12-26赵启全黄文祥
简 丽, 赵启全, 贾 蓓, 黄文祥
(重庆市大足区人民医院 1内分泌科, 2呼吸内科,重庆 402360;3重庆市传染病寄生虫病学重点实验室,重庆医科大学附属第一医院感染科,重庆 400016)
·短篇论著·
金葡菌主动外排蛋白QacA α-螺旋1、2及TMS1氨基酸的功能研究*
简 丽1, 赵启全2, 贾 蓓3△, 黄文祥3
(重庆市大足区人民医院1内分泌科,2呼吸内科,重庆 402360;3重庆市传染病寄生虫病学重点实验室,重庆医科大学附属第一医院感染科,重庆 400016)
目的: 评价金黄色葡萄球菌多药耐药主动外排蛋白QacA α-螺旋1和2及跨膜区(TMS)1上的氨基酸对于底物转运的重要性。方法:采用半胱氨酸定点诱变的方法诱变QacA蛋白α-螺旋1和2及TMS1上的氨基酸I2、S3、F4、F5、T6、K7、D10、M11、R17、W18、T19、A20、V21、V22、V23、F29、D34、P43、E48、E50、P51和Q55。测定诱变菌株最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)以及荧光运输试验分析氨基酸的功能变化。结果:MIC和MBC结果分析提示获得的诱变菌株S3C、T6C、R17C、T19C、A20C、F29C和E50C对所测药物完全恢复敏感性,F4C、F5C和P51C对所测药物耐药性明显降低。运输试验结果与MIC、MBC结果一致,提示10株诱变菌株失去对底物的转运能力。结论:QacA蛋白α-螺旋1和2及TMS1上的氨基酸S3、F4、F5、T6、R17、T19、A20、F29、E50 和 P51可能与QacA蛋白一价和二价阳离子底物的结合和转运功能密切相关。
金黄色葡萄球菌; QacA蛋白;跨膜区; α-螺旋; 半胱氨酸定点诱变
金黄色葡萄球菌是导致社区感染和院内感染的重要病原菌[1]。金黄色葡萄球菌胞壁及其分泌的外毒素具有极强的致病力[2-3]。该菌对多种抗菌药物的高度耐药性给临床治疗带来了极大的困难。据国内耐药监测统计,2008~2011年金黄色葡萄球菌院内感染率分别为32.2%、32.5%、32.8%和35.56%,感染的分布各地区虽有不同,但总体上有逐年上升的趋势。……
