(衡水市第四人民医院呼吸内科，河北 衡水 053000)

·临床医学·

革兰氏阴性杆菌在呼吸道的感染特性及药敏分析

刘晶

(衡水市第四人民医院呼吸内科，河北 衡水 053000)

目的探讨呼吸性疾病患者革兰氏阴性杆菌的分布情况，并分析其耐药性。方法收集本院呼吸内科100例患者的125株感染标本的细菌株，包括痰液标本、血液标本，对所有标本进行细菌定量培养，以细菌数≥106为致病菌诊断标准，分析其中的革兰氏阴性菌的分布情况，并进行药敏试验。结果125株革兰氏阴性杆菌中34株为大肠埃希菌，24株鲍曼不动杆菌，18株铜绿假单胞菌，10株阴沟肠杆菌，18株肺炎克雷伯菌以及21株其他菌株。其中阿米卡星、头孢噻肟、美罗培南以及头孢曲松对大肠埃希菌的耐药率分别为79.41%、76.47%、76.47%、70.59%，而大肠埃希菌对氨苄西林以及头孢哌酮比较敏感；鲍曼不动杆菌对氨苄西林和头孢唑啉的耐药率为100.00%；对头孢曲松的耐药率为91.67%；铜绿假单胞菌对氨苄西林以及头孢曲松的耐药率为100.00%，对头孢噻肟以及左氧氟沙星的耐药率为94.44%，阴沟肠杆菌对氨苄西林的耐药率为90.00%。结论呼吸道感染常见病原菌以大肠埃希氏杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌等为主。

呼吸内科； 革兰氏阴性杆菌； 耐药性

呼吸系统感染主要的致病菌是革兰氏阴性杆菌[1]，由于抗生素的滥用是重要原因，导致产生越来越多的耐药菌，这对临床治疗用药选择合适的抗生素提出了很高的要求[2]。由于耐药细菌增多，往往导致呼吸性疾病迁延不愈。由于不同的地方其医疗水平不同，故抗菌药物的耐药性也有一定的差异，所以需要对本地区的抗生素耐药情况进行了解，从而更好地指导诊疗，本文就本院呼吸内科中革兰氏阴性杆菌分布及其耐药性进行分析。

1 资料与方法

1.1一般资料采用回顾性分析方法，选取本院2014年1月～2015年12月呼吸内科100例患者作为本次研究对象，其中男57例，女43例，年龄41～89岁，平均年龄63.5±6.4岁，病程3～30天，平均病程10.9±2.1天，其中轻度肺部感染46例，中度27例，重度27例。然后收集100例患者的125株感染标本进行试验，包括痰液标本以及血液标本。

1.2方法

1.2.1 标本采集 患者早晨起床后用力将喉咙深处的痰液咳进痰盒内，将痰盒盖好，对于气道分泌物堵塞以及不合作的患者使用痰管外接吸引器进行标本采集。在吸引器吸管中段接一无菌瓶，瓶两侧各有一开口小管，其中一管接吸痰管，另一管接吸引器，开动吸引器后，痰液即被吸入瓶内。将采集的所有标本及时送检，药物敏感性试验采用NCCLS(美国临床实验室标准化委员会)推荐的纸片扩散法(Kirby-Bauer)和MIC法进行检测。培养前将痰标本振荡洗涤来减少正常菌群的污染，将痰加入含有10 mL灭菌生理盐水试管剧烈振荡5～10 s，然后用接种环将沉淀于管底的脓痰小片沾出放入另一试管内，以同样的方法反复2次，最后将剩余的脓痰分别接种在血平板和麦康凯平摄上培养24 h后观察结果。对呈优势生长曲线的菌群进一步挑选纯化至单一菌种。其中质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金色葡萄球菌ATCC25923。抗菌药物纸片和头孢硝噻吩纸片为OXOID公司提供。

1.2.2 药敏实验 选择进行药敏实验的药物有氨苄西林、环丙沙星、头孢曲松、头孢唑啉、亚胺培南、左氧氟沙星、头孢哌酮、头孢噻肟、呋喃妥因、头孢西丁、美罗培南。培养基药敏试验用MH琼脂，流感嗜血杆菌药敏试验用嗜血杆菌培养基HTM和营养补充剂SR158。上述培养基与营养补充剂均为OXOID公司的商品。β-内酰胺酶的检测采用头孢硝噻吩纸片法检测流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌中的β-内酰胺酶，采用NCCLS2008年版推荐的ESBLs的纸片筛选法和酶抑制剂增强纸片确证法测定大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs产生株。

1.2.3 革兰氏阴性杆菌的测定 采用手工法培养并分离标本，利用标准线方法将标本接种于相应培养基板上，在37 ℃条件下培育1～2天，根据培养后菌落的形态进行镜检，利用生化反应法培养分离菌株，除革兰阳性菌外。

1.3统计学方法采用SPSS17.0统计软件进行统计分析，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1呼吸内科住院患者的革兰氏阴性杆菌构成比125株革兰氏阴性杆菌中34株为大肠埃希菌，其余分别为24株鲍曼不动杆菌，18株铜绿假单胞菌，10株阴沟肠杆菌，18株肺炎克雷伯菌以及21株其他菌株，见表1。

表1革兰氏阴性杆菌分布比例

革兰氏阴性杆菌株数比例(%)大肠埃希菌3427.20鲍曼不动杆菌2419.20铜绿假单胞菌1814.40肺炎克雷伯菌1814.40阴沟肠杆菌108.00其他2116.80合计125100.00

2.2主要的革兰氏阴性菌的耐药性分析阿米卡星、头孢噻肟、美罗培南以及头孢曲松应用于大肠埃希菌的治疗后耐药率分别为79.41%、76.47%、76.47%、70.59%，对氨苄西林以及头孢哌酮比较敏感。鲍曼不动杆菌对氨苄西林和头孢唑啉为100.00%，对头孢曲松的耐药率为91.67%，对其他药物的耐药率均较高。铜绿假单胞菌对氨苄西林以及头孢曲松的耐药率为100.00%，对头孢噻肟以及左氧氟沙星的耐药率为94.44%，阴沟肠杆菌对氨苄西林的耐药率为90.00%，见表2。

3 讨 论

近些年来，临床上抗生素的耐药情况愈来愈严重，受到临床医师的关注，多重耐药菌不断在临床上出现，也导致抗感染治疗的难度在不断增加，往往使得患者的病情反复发作，迁延不愈[3]，延长患者的住院时间，合理应用抗生素，提高抗菌效果，降低患者的死亡率势在必行[4]。

革兰氏阴性杆菌在呼吸道感染中是最常见的一类致病细菌，本文发现，革兰氏阴致病菌中最多的是大肠埃希菌，接下来分别为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌，与之前的研究结果是相一致的[5-6]。

表2主要的革兰氏阴性均的耐药性分析

药物大肠埃希菌(n=34)鲍曼不动杆菌(n=24)铜绿假单胞菌(n=18)阴沟肠杆菌(n=10)氨苄西林4(11.76)24(100.00)18(100.00)9(90.00)环丙沙星18(52.94)17(70.83)16(88.89)2(20.00)头孢曲松24(70.59)22(91.67)18(100.00)6(60.00)头孢唑啉9(26.47)24(100.00)16(88.89)6(60.00)亚胺培南23(67.65)17(70.83)3(16.67)1(10.00)左氧氟沙星6(17.65)17(70.83)17(94.44)4(40.00)头孢哌酮5(14.71)19(79.17)3(16.67)4(40.00)头孢噻肟26(76.47)13(54.17)17(94.44)7(70.00)呋喃妥因18(52.94)12(50.00)11(61.11)4(40.00)头孢西丁18(52.94)17(70.83)3(16.67)6(60.00)美罗培南26(76.47)18(75.00)0(0.00)0(0.00)阿米卡星27(79.41)10(41.67)2(11.11)3(30.00)

大肠埃希菌是临床感染中一种较为常见且重要的致病菌，在临床诊疗过程中，其耐药株有喹诺酮类、氯霉素、磺胺类等抗菌药物，因为具有多重耐药的特点，所以患者感染后临床控制难度相对较大[7-8]。从本次药敏试验结果来看，该病菌对氨苄西林和头孢哌酮的耐药率相对较低，因此可作为该细菌治疗的抗生素药物。铜绿假单胞菌发生耐药性的影响因素相对复杂，研究中发现其对氨苄西林和头孢曲松的耐药率相对较高，而对美罗培南及阿米卡星的耐药率则相对较低，因此临床上可采用美罗培南及阿米卡星抗生素联合治疗[9]。本文鲍曼不动杆菌对氨苄西林和头孢唑啉耐药性均较强，达到100%，对头孢曲松的耐药率达到了91.67%。其耐药机制可能是鲍曼不动杆菌可产生β-内酰胺酶、碳青霉烯水解酶以及TEM-l、TEM-2酶等，这些酶导致抗生素失活[10]，而铜绿假单胞菌对于氨苄西林和头孢曲松的耐药率均达到了100%，对头孢噻肟以及左氧氟沙星的耐药率为94.44%，这是由于细菌的外膜通透性出现改变、OprD2蛋白缺失、导致细菌出现特异性的氨基糖苷类纯化作用，从而出现多种β-内酰胺酶以及头孢菌素酶，导致抗菌药物出现靶位改变，形成生物膜[11]，以上所介绍几类主要致病菌耐药性均不断升高，但是临床上新型抗生素的开发速度却远远滞后，对于临床抗感染治疗带来了很大的难度。

总之，呼吸内科病房中常见病原菌以大肠埃希氏杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌等。其中不同的细菌对抗菌药物敏感性差异较大，临床上要根据本科室中致病菌的分布及其耐药情况分析，合理使用抗生素。

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TheInfectionCharacteristicsandDrugSensitivityAnalysisofGramNegativeBacilliintheRespiratoryTract

LIU Jin

(DepartmentofInternalMedicine,HengshuiFourthHospital,Hengshui,Hebei053000,China)

ObjectiveTo investigate the distribution of gram negative bacilli in patients with respiratory disease and analyze their drug resistance.Methods125 bacterial strains of infections from 100 patients with respiratory medicine specimens,which include sputum and blood specimen,were collected and cultured.By taking Bacteria count more than106 as the standard,the study analysed the distribution of gram negative bacteria,and took drug sensitive test.ResultsAmong 125 strains of pathogenic gram negative bacilli,there were 34 strains of pneumonia escherichia coli,24 strains of acinetobacter baumannii,18 strains of pseudomonas aeruginosa,10 strains of enterobacter cloacae,18 strains of klebsiella pneumoniae and 21 strains of other strains.The amikacin,cefotaxime cefotaxime,meropenem and ceftriaxone against escherichia coli resistance ratio was 79.41%,76.47%,76.47%,70.59% respectively,while escherichia coli is sensitive to cefoperazone and ampicillin.Bauman Acinetobacter resistance to ampicillin and cefazolin was 100%,and to ceftriaxone was 91.67%.Pseudomonas aeruginosa resistant rate to ampicillin and ceftriaxone was 100%,to levofloxacin and levofloxacin was 94.44%.Enterobacter cloacae of ampicillin resistance rate was 90%.ConclusionEscherichia coli,bauman Acinetobacter,pseudomonas aeruginosa were the main gram negative bacillis causing hospitalized patients with?drug resistance.

respiratory medicine; gram-negative bacilli; drug resistance

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.029

2015-12-30；

2016-04-12

R56

A

蒋湘莲)