三个道地产区丹参混合提取物对大鼠脑缺血再灌注后bc1-2、bax表达的影响*
2016-12-15李红刚王红鸽聂晓枫陈卫银陕西省渭南职业技术学院渭南714000
李红刚 王红鸽 聂晓枫 孙 陈卫银 陕西省渭南职业技术学院(渭南714000)
三个道地产区丹参混合提取物对大鼠脑缺血再灌注后bc1-2、bax表达的影响*
目的:通过观察四川、山东、河南三个道地产区丹参混合提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织bc1-2和bax蛋白表达的影响,探讨三产区丹参对神经细胞凋亡的影响。方法:采用颈内动脉线栓加环扎法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,再灌注24h后各组bc1-2和bax蛋白的表达采用免疫组化法检测。结果:再灌注24h后,模型组脑内损伤区周围bcl-2的表达明显增加(P<0.05),三产区丹参组均能明显上调bcl-2的表达,与模型组比较有显著差异(P<0.05),其中山东丹参组上调的幅度最大,与河南、四川丹参组比较有显著差异(P<0.05),河南、四川丹参组比较无显著差异(P>0.05);再灌注24h后,模型组脑内损伤区周围bax的表达显著增加(P<0.01),三产区丹参组均能明显降低bax的表达,与模型组比较有显著差异(P<0.01),其中四川丹参组降低的幅度最大,山东丹参组次之,河南丹参组降低的幅度最小,三组比较均有显著差异(P<0.05)。结论:三个道地产区丹参混合提取物均能通过上调bcl-2表达,降低bax的表达,从而抑制神经细胞凋亡,发挥脑保护作用。不同产区丹参混合提取物对各指标表达影响不同,其原因可能与不同产区丹参混合提取物所含活性成分的含量不同,作用靶点不一致有关。
丹参是常用活血化瘀药,其对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的影响报道较多,但查阅文献,未见不同产地丹参对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型影响的报道。本研究选取四川、河南、山东三个道地产区丹参混合提取物,旨在观察不同产区丹参对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织bc1-2、bax表达的影响,从而探讨其对神经细胞凋亡的影响。
1 材料和方法 1.1 动 物 健康SD大鼠60只(购于四川大学),合格证号:scxk(川)-10-2006,雌雄各半,体重275.25±24.28g,清洁级,鼠龄7~8周。
1.2 药品与试剂 采取四川中江古店、山东沂南、河南方城栽培丹参根10kg,样品采集后快速运回实验室,经加工处理后,干燥成药材,由成都中医药大学药学院提取制成0.4g/ml生药的供试品溶液。兔抗大鼠bcl-2单克隆抗体、兔抗大鼠bax单克隆抗体 ( 购买自北京博奥森生物技术有限公司);生物素化羊抗兔IgG抗体(购买自北京中衫金桥生物技术有限公司)。……
