白涛 齐鲁楠 陈洁 叶甲舟 吴飞翔 彭涛 黎乐群

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的发生是一个多因素、多基因、多步骤的过程。其中癌基因的激活和抑癌基因的失活扮演着十分重要的角色。p53是迄今发现与人类肿瘤相关性较高的抑癌基因，也是研究较为广泛的基因之一［1］。p53与乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）以及黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）与HCC的发生紧密相关，可能与HBV和AFB1的协同作用致使p53exon7-249位点发生突变，以及细胞DNA与HBV整合，引起p53基因突变或蛋白的异常表达有关［2～4］。本研究采用PCR技术及免疫组化法检测p53基因突变及蛋白在HBV及AFB1双暴露下HCC组织中的表达情况，探讨p53基因在不同HBV、AFB1暴露情况下的突变及其蛋白的表达水平，并分析其与HCC的关系及意义。

1 材料和方法

1.1 研究对象

82例HCC均为2008年10月至2010年5月在广西医科大学附属肿瘤医院行手术切除HCC组织的患者。HCC组织标本均经术后病理检查证实，所有患者术前均未接受经导管肝动脉灌注化疗。乙型肝炎病毒暴露定义［5］为患者血清学或肝组织HBV标志物（HBsAg）阳性；黄曲霉毒素暴露定义［5］为患者肝组织黄曲霉毒素B1-DNA加合物免疫组化染色阳性。82例患者中男72例，女10例，年龄37～65岁，中位年龄53岁；肿瘤直径≤5 cm 44例，＞5 cm 38例。82例HCC患者根据HBV与AFB1暴露情况分为HBV（+）/AFB1（+）（实验组A组）44例；HBV（+）/AFB1（-）（对照组B组）15例；HBV（-）/AFB1（+）（对照组C组）15例；HBV（-）/AFB1（-）（对照组D组）8例。另取肝血管瘤、肝外伤、肝移植供体的肝组织20例为正常对照组。所有标本采集均履行患者知情同意并由本人或委托人签字同意，研究方案通过医院医学伦理委员会审核同意。

1.2 主要实验试剂

6A10单克隆抗体由美……