山楂原花青素调节环氧合酶-2表达诱导Eca109食管癌细胞凋亡
2016-11-11尹淑英衣卫杰石塔拉韩文婷
宓 伟,练 武,尹淑英,衣卫杰,石塔拉,韩文婷
山楂原花青素调节环氧合酶-2表达诱导Eca109食管癌细胞凋亡
宓 伟,练 武,尹淑英,衣卫杰,石塔拉,韩文婷
(滨州医学院公共卫生与管理学院,山东 烟台 264003)
探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)通过磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3-kinase/serine threonine protein kinase,PI3K/Akt)信号通路调节环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达,诱导Eca109食管癌细胞凋亡的分子机制。体外常规培养食管癌细胞株,配制25、50、100、200、300、400 μg/mL不同质量浓度的HPC,CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测并计算不同质量浓度HPC在72 h内对Eca109食管癌细胞的抑制率,选取IC50=250 μg/mL作为HPC处理组剂量,并设对照组。Western blotting法检测Eca109细胞PI3K和Akt磷酸化程度、Caspase-3和COX-2蛋白表达水平,反转录聚合酶链式反应(reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Eca109细胞COX-2 mRNA表达水平,Annexin V-FITC/PI法检测0、12、24、36、48、72 h时HPC对Eca109食管癌细胞凋亡率的影响。结果表明:HPC处理组Eca109食管癌细胞PI3K、Akt磷酸化程度随着处理时间延长逐渐降低(P<0.01),在48 h时活性最低,HPC处理组Eca109食管癌细胞COX-2 mRNA的表达量与对照组比较明显降低(P<0.01)。在HPC的作用下,Eca109食管癌细胞Caspase-3蛋白表达量在48、72 h时最强(P<0.01),COX-2蛋白表达量在72 h时最低(P<0.01)。Eca109食管癌细胞凋亡率随着时间的延长越来越高,在72 h时达到63.54%(P<0.01)。HPC可通过PI3K/Akt途径下调COX-2表达,从而诱导Eca109食管癌细胞凋亡。
山楂原花青素;环氧合酶-2;食管癌;细胞凋亡
全世界食管癌的发病率在近些年呈上升趋势,2008年的一项调查显示,全世界67 亿人口新发食管癌约48.3 万例,发病率为7.0/10万,居恶性肿瘤发病率第9位,死亡率为5.8/10万,居恶性肿瘤死亡率第8位[1]。中国食管癌发病率为16.7/10万,居所有恶性肿瘤发病率的第5位,死亡率为13.4/10万,居所有恶性肿瘤死亡率的第4位,按性别统计,我国男性食管癌发病率居各类恶性肿瘤第4位,女性食管癌发病率居第7位,男、女食管癌死亡率均居第4位[2]。……
