徐斐，李珂珂*，陈丽荣，弓晓杰*

(1.大连大学 医学院，辽宁 大连 116622；2.大连大学 环境与化学工程学院，辽宁 大连 116622)

人参花醇提物中的皂苷类化学成分△

徐斐1，李珂珂1*，陈丽荣2，弓晓杰1*

(1.大连大学 医学院，辽宁 大连116622；2.大连大学 环境与化学工程学院，辽宁 大连116622)

目的：研究人参PanaxginsengC.A.Meyer(Araliaceae)花中的皂苷类成分。方法：采用多种色谱技术对人参花的醇提物进行分离纯化，并根据理化性质和波谱学数据对化合物进行结构鉴定。结果：从人参花70%乙醇水溶液提取物中分离得到11个化合物，分别鉴定为人参皂苷Re(1)、20(R)-人参皂苷Rg1(2)、20(S)-人参皂苷Rh1(3)、20(R)-人参皂苷Rh1(4)、人参皂苷Rd(5)、人参皂苷F1(6)、人参皂苷F5(7)、人参皂苷F3(8)、20(S)-原人参三醇(9)、达玛-20(21)，24-二烯-3β，6α，12β-三醇(10)和达玛-(E)-20(22)，24-二烯-3β，6α，12β-三醇(11)。结论：化合物3、9～11为首次从人参花中分离得到。

人参花；化学成分；达玛-20(21)，24-二烯-3β，6α，12β-三醇；达玛-(E)-20(22)，24-二烯-3β，6α，12β-三醇

人参花为五加科(Araliaceae)人参属(Panax)植物人参PanaxginsengC.A.Meyer的干燥花蕾，每年7至8月份采收，属人参之精华，素有“绿色黄金”之称。《本草纲目》记载：人参花性温和，味甘、微苦。现代药学研究表明，人参花与人参根一样都含有人参皂苷，是其主要生物活性成分，并且人参花中含5%～7%的总皂苷，是根中的5～6倍[1]。近年来，从人参花中分离得到了多个具有生物活性的新颖结构人参皂苷[2-4]。为系统研究人参花中的皂苷类成分，本实验从人参花的乙醇提取物中分离鉴定了11个化合物，包括8个皂苷和3个皂苷元，本文报道其分离鉴定过程。

1 仪器与材料

1.1仪器

BrukerAVANCEDRX-500型(Bruke公司，1H，500MHz；13C，125MHz，TMS内标)核磁共振仪；制备型高效液相色谱仪[LC3000，C18色谱柱(250mm×10mm，5μm)]；LC-MS-2010EV电喷雾离子肼质谱仪(日本Shimadzu)。

1.2材料

柱色谱硅胶(200～300目，青岛海洋化工厂)；SBCMCIgel反相色谱填料(F型75-150μm，成都科谱生物有限公司)；显色剂为10%硫酸-乙醇溶液。

甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷(分析纯，中国化工集团)，甲醇、乙腈(色谱纯，美国TEDIA)，水为超纯水。

本研究所用材料为人参的干燥花。人参花药材于2014年7月采自吉林省通化县，经大连大学弓晓杰教授鉴定为人参花。标本(No.2014003)存放于大连大学医学院中药学实验室。

2 提取与分离

取干燥的人参花4kg，70%乙醇水溶液回流提取3次，每次2h，合并提取液，减压浓缩，回收乙醇，得浸膏。水混悬后分别用环己烷和乙酸乙酯进行萃取，减压回收溶剂后得环己烷部位204g、乙酸乙酯部位35g、水部位645g。

取水部位200g，采用大孔树脂色谱分离，依次以0%、20%、40%、50%、60%、80%甲醇水溶液和甲醇洗脱，每500mL为一个流分，薄层色谱检识，显色剂为10%硫酸乙醇溶液，合并斑点相近的流分，浓缩回收溶剂得到10个部分(Fr.1～Fr.10)。Fr.3经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(40%→100%)梯度洗脱，再经硅胶柱色谱，以三氯甲烷-甲醇-水(10∶3∶0.4)洗脱，最后经高效液相制备色谱(48%甲醇水溶液)纯化，得化合物1(205.3mg)和2(116.2mg)。Fr.4经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(30%→100%)洗脱，然后以三氯甲烷-甲醇-水(12∶3∶0.4)为洗脱剂经反复硅胶柱色谱分离，再经高效液相制备色谱(60%甲醇水溶液)纯化，得化合物3(18.2mg)和4(15.6mg)。Fr.5经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(40%→100%)梯度洗脱，再以硅胶柱色谱分离纯化，三氯甲烷-甲醇-水(10∶3∶0.4)洗脱，得到化合物5(123.3mg)。

取乙酸乙酯部位30g，采用硅胶柱色谱分离，以三氯甲烷-乙醇-水(100∶10∶1→10∶10∶1)梯度洗脱，每500mL为1个流分，薄层色谱检识，显色剂为10%硫酸乙醇溶液，合并斑点相近流分，浓缩回收溶剂得到12个流分(Fr.1～Fr.12)。Fr.8经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(50%→100%)梯度洗脱，得到化合物6(220mg)。Fr.9经高效液相制备色谱(55%甲醇水溶液)纯化，得到化合物7(11.4mg)。Fr.10经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(40%→100%)梯度洗脱，再经过高效液相制备色谱(55%甲醇水溶液)纯化，得到化合物8(16.7mg)。Fr.3经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(60%→100%)梯度洗脱，经高效液相制备色谱70%甲醇水溶液纯化，得到化合物9(11.2mg)。Fr.2经MCI硅胶柱色谱，以甲醇-水(60%→100%)梯度洗脱，经高效液相制备色谱70%甲醇水溶液纯化，得到化合物10(8.6mg)和11(9.7mg)。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C48H82O18。ESI-MSm/z969.7[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：6.47(1H，br s，H-rha-1″)，5.34(1H，t，J=7.4 Hz，H-24)，5.24(1H，d，J=8.0 Hz，H-glc-1′)，5.16(1H，d，J=7.8 Hz，H-glc-1‴)，2.11(3H，s，H-28)，1.67(3H，s，H-26)，1.66(3H，s，H-27)，1.61(3H，s，H-21)，1.38(3H，s，H-29)，1.19(3H，s，H-18)，0.98(3H，s，H-19)，0.96(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[5]，鉴定化合物1为人参皂苷Re。

化合物2：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C42H72O14。ESI-MSm/z823.6[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.28(1H，t，J=7.0 Hz，H-24)，5.17(1H，d，J=8.0 Hz，H-glc-1′)，5.03(1H，d，J=7.8 Hz，H-glc-1″)，2.07(3H，s，H-28)，1.63(3H，s，H-26)，1.62(3H，s，H-27)，1.60(3H，s，H-21)，1.41(3H，s，H-29)，1.18(3H，s，H-18)，1.05(3H，s，H-19)，0.84(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[6]，鉴定化合物2为20(R)-人参皂苷Rg1。

化合物3：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C36H62O9。ESI-MSm/z661.5[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.36(1H，t，J=7.5 Hz，H-24)，5.05(1H，d，J=7.5 Hz，H-1′)，2.10(3H，s，H-28)，1.80(3H，s，H-26)，1.66(3H，s，H-27)，1.62(3H，s，H-21)，1.42(3H，s，H-29)，1.22(3H，s，H-18)，1.06(3H，s，H-19)，0.86(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[7]，鉴定化合物3为20(S)-人参皂苷Rh1，为首次从人参花中分离得到。

化合物4：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C36H62O9。ESI-MSm/z661.5[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.33(1H，t，J=7.9 Hz，H-24)，5.07(1H，d，J=8.0 Hz，H-1′)，2.10(3H，s，H-28)，1.72(3H，s，H-26)，1.67(3H，s，H-27)，1.64(3H，s，H-21)，1.42(3H，s，H-29)，1.28(3H，s，H-18)，1.10(3H，s，H-19)，0.91(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[7]，鉴定化合物4为20(R)-人参皂苷Rh1。

化合物5：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C48H82O18。ESI-MSm/z969.6[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.57(1H，br s，H-24)，5.38(1H，d，J=7.5 Hz，H-glc-1″)，5.21(1H，d，J=7.6 Hz，H-glc-1‴)，4.91(1H，d，J=7.5 Hz，H-glc-1′)，1.65(3H，s，H-28)，1.62(3H，s，H-26)，1.50(3H，s，H-27)，1.31(3H，s，H-21)，1.13(3H，s，H-29)，0.98(3H，s，H-18)，0.84(3H，s，H-19)，0.79(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[5]，鉴定化合物5为人参皂苷Rd。

化合物6：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C36H62O9。ESI-MSm/z661.4[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.27(1H，t，J=7.0 Hz，H-24)，5.20(1H，d，J=8.0 Hz，H-glc-1′)，2.00(3H，s，H-28)，1.64(3H，s，H-26)，1.62(3H，s，H-27)，1.61(3H，s，H-21)，1.47(3H，s，H-29)，1.12(3H，s，H-18)，1.04(3H，s，H-19)，1.00(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[8]，鉴定化合物6为人参皂苷F1。

化合物7：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C41H70O13。ESI-MSm/z793.4[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.34(1H，t，J=7.0 Hz，H-24)，5.17(1H，br s，H-ara-1′)，5.13(1H，d，J=8.0 Hz，H-glc-1′)，1.99(3H，s，H-28)，1.65(3H，s，H-26)，1.62(3H，s，H-27)，1.60(3H，s，H-21)，1.46(3H，s，H-29)，1.12(3H，s，H-18)，1.02(3H，s，H-19)，0.98(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[9]，鉴定化合物7为人参皂苷F5。

化合物8：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C41H70O13。ESI-MSm/z793.4[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.35(1H，br s，H-24)，5.11(1H，d，J=8.0 Hz，H-glc-1′)，4.97(1H，br s，H-ara-1′)，1.98(3H，s，H-28)，1.69(3H，s，H-26)，1.65(3H，s，H-27)，1.63(3H，s，H-21)，1.45(3H，s，H-29)，1.11(3H，s，H-18)，1.02(3H，s，H-19)，0.99(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1、2。参考文献报道[10]，鉴定化合物8为人参皂苷F3。

化合物9：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C30H52O4。ESI-MS m/z 499.5[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.33(1H，t，J=7.5 Hz，H-24)，2.01(3H，s，H-28)，1.68(3H，s，H-26)，1.64(3H，s，H-27)，1.46(3H，s，H-21)，1.43(3H，s，H-29)，1.13(3H，s，H-18)，1.03(3H，s，H-19)，0.99(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1。参考文献报道[11]，鉴定化合物9为20(S)-原人参三醇，为首次从人参花中分离得到。

化合物10：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C30H50O3。ESI-MS m/z 481.5[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.31(1H，m，H-24)，5.17(1H，br s，H-21a)，4.94(1H，br s，H-21b)，2.02(3H，s，H-28)，1.69(3H，s，H-26)，1.63(3H，s，H-27)，1.48(3H，s，H-29)，1.19(3H，s，H-18)，1.05(3H，s，H-19)，1.01(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1。参考文献报道[12]，鉴定化合物10为达玛-20(21)，24-二烯-3β，6α，12β-三醇，为首次从人参花中分离得到。

化合物11：白色粉末，10%硫酸乙醇试剂显紫色斑点。分子式为C30H50O3。ESI-MSm/z481.5[M+Na]+。1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ：5.52(1H，t，J=6.0 Hz，H-22)，5.24(1H，m，H-24)，2.04(3H，s，H-28)，1.86(3H，s，H-21)，1.66(3H，s，H-27)，1.61(3H，s，H-26)，1.49(3H，s，H-29)，1.19(3H，s，H-19)，1.04(3H，s，H-18)，1.00(3H，s，H-30)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)数据见表1。参考文献报道[13]，鉴定化合物11为达玛-(E)-20(22)，24-二烯-3β，6α，12β-三醇，为首次从人参花中分离得到。

表1 化合物1～11苷元部分的13C-NMR数据(125 MHz，C5D5N)

表2 化合物1～8糖链部分的13C-NMR 数据(125 MHz，C5D5 N)

4 结论

本文报道从新鲜的人参花70%乙醇水提取物中分离得到的11个化合物，其中化合物3、9、10和11为首次从人参花中分离得到。

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SaponinsChemicalConstituentsfromAlcoholExtractofFlowerBudsofPanaxginseng

XUFei1，LIKeke1，CHENLirong2，GONGXiaojie1

(1.CollegeofMedical，DalianUniversity，Dalian116622，China；(2.CollegeofEnvironmentalandChemicalEngineering，DalianUniversity，Dalian116622，China)

Objective：To study the chemical constituents of the flower buds ofPanaxginsengC.A.Meyer.Methods：The chemical constituents were isolated and purified by various column chromatographies and the structures were identified by combination of spectroscopic methods (MS，1H，13C-NMR) as well as comparisons with the literature data.Results：Chemical investigation of the flower buds ofP.ginsengled to the isolation of eleven compounds，including ginsenoside Re (1)，20(R)-ginsenoside Rg1(2)，20(S)-ginsenoside Rh1(3)，20(R)-ginsenoside Rh1(4)，ginsenoside Rd (5)，ginsenoside F1(6)，ginsenoside F5(7)，ginsenoside F3(8)，20(S)-protopanaxatriol (9)，dammar-20(21)，24-diene-3β，6α，12β-triol (10) and dammar-(E)-20(22)，24-diene-3β，6α，12β-triol (11).Conclusion：Compounds3，9-11were firstly isolated from the flower buds ofP.ginseng.

Flower buds ofPanaxginseng；chemical constituent；dammar-20(21)，24-diene-3β，6α，12β-triol；dammar-(E)-20(22)，24-diene-3β，6α，12β-triol

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.1.007

2015-11-07)

国家自然科学基金(81172949)；辽宁省教育厅科学技术研究一般研究项目(L2012439)；辽宁省优秀人才支持计划(LR2013058)；辽宁省自然科学基金计划(2015020657)；辽宁省科技厅科学技术计划项目(2014204007)；大连市科技局科技计划项目(2014E12SF071)

*

李珂珂，博士，研究方向：活性天然产物分离与活性筛选，E-mail：like905219@163.com；弓晓杰，教授，硕士生导师，研究方向：中药新药开发，E-mail：gxjclr@163.com