庞春艳，王　蓓，剧锦哲，王永福

(内蒙古科技大学包头医学院风湿免疫研究所/包头医学院第一附属医院风湿免疫科，内蒙古包头 014010)



α-胞衬蛋白siRNA对人涎腺导管细胞的影响*

庞春艳，王蓓，剧锦哲，王永福△

(内蒙古科技大学包头医学院风湿免疫研究所/包头医学院第一附属医院风湿免疫科，内蒙古包头 014010)

目的观察α-胞衬(α-Fodrin)蛋白小干扰RNA(siRNA)对人涎腺导管(HSG)细胞的影响，探讨α-Fodrin siRNA治疗干燥综合征(SS)的作用。方法实验分对照组、空载体组、α-Fodrin siRNA1组及α-Fodrin siRNA2组，将成功构建的10 μg α-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表达载体分别采用脂质体法转染HSG细胞，空载体组HSG细胞转染等剂量的pGFP-V-RS空载体。转染后24、48、72和96 h观察细胞转染效率，实时荧光定量(RT)-PCR法检测4组HSG细胞中α-Fodrin mRNA的表达水平；细胞荧光免疫法检测4组细胞中α-Fodrin蛋白的表达水平；ELISA法检测4组细胞上清液中IFN-γ、IL-10的表达水平。结果转染后48 h HSG细胞转染效率最高；转染后48 h α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组 HSG细胞中α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组(P<0.05)，且α-Fodrin siRNA2组中α-Fodrin mRNA的表达水平低于α-Fodrin siRNA1组的表达水平(P<0.05)；α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清液中IL-10的水平明显升高，较对照组和空载体组差异有统计学意义(P<0.05)，α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组比较差异无统计学意义(P>0.05)；α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清中IFN-γ的水平低于对照组和空载体组，但 4组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论HSG细胞转染α-Fodrin siRNA载体后，α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平下降，同时细胞上清中IL-10的水平升高、IFN-γ水平下降，提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎性反应，为SS的治疗提供实验依据。

RNA,小分子干扰；α-胞衬蛋白；人涎腺导管细胞；白细胞介素-10；干扰素-γ

α-胞衬(α-Fodrin)蛋白是从干燥综合征(sjögren′s syndrome，SS)小鼠唇腺中提取的涎腺特异性自身抗原，在SS的发病过程中起非常重要的作用，对SS的诊断和指导治疗都起到了很好的作用，有较好的特异度和灵敏度[1-2]。人涎腺导管(human salivary gland cells,HSG)细胞来源于人下颌下腺的闰管上皮，常作为研究SS的细胞模型。本……