张猛　张全　谭雨莎

miR-497靶向Bcl-2调控肝癌细胞增殖及凋亡的研究

张猛张全谭雨莎

目的：探讨miR-497靶向Bcl-2对肝癌细胞增殖、凋亡的调控作用。方法：选取肝癌组织及相应远癌正常组织，分别采用逆转录PCR（reverse transcriptton PCR，RT-PCR）、Western blot检测组织中miR-497及Bcl-2蛋白表达；选取肝癌细胞系HepG2，分别转染miR-497 mimics及对照寡核苷酸，采用RT-PCR、Western blot检测组织中miR-497及Bcl-2蛋白表达，采用MTT法检测各组细胞增殖活性，采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡，采用双荧光素酶报告基因检测细胞荧光酶活性。结果：1）与远癌正常组织相比，肝癌组织中miR-497表达明显降低（P＜0.05），Bcl-2蛋白表达明显增高（P＜0.05）；2）与转染对照寡核苷酸相比，转染miR-497可使HepG2中miR-497表达增高（P＜0.05），Bcl-2蛋白表达降低（P＜0.05）；3）与转染对照寡核苷酸相比，共转染miR-497与Bcl-2-WT可使HepG2荧光素酶活性降低（P＜0.05）；4）转染miR-497后，HepG2增殖活性较转染对照寡核苷酸明显降低（P＜0.05），而转染miR-497+Bcl-2后，HepG2增殖活性较单纯转染miR-497明显提高（P＜0.05）；5）转染miR-497后，HepG2总凋亡比例较转染对照寡核苷酸明显增高（P＜0.05）；而转染miR-497+Bcl-2后，HepG2总凋亡比例较单纯转染miR-497明显降低（P＜0.05）。结论：miR-497可通过靶向Bcl-2抑制肝癌细胞增殖同时促进细胞凋亡。

miR-497Bcl-2肝癌细胞增殖细胞凋亡

肝癌是临床常见恶性肿瘤，致死率较高［1］。由于难以早期发现，故仅有少部分患者可行手术治疗［2-3］。放化疗是晚期肝癌常用的辅助治疗手段，但不良反应较大，且无法获得长期生存。因此，寻求更安全、高效的治疗方案是临床亟待解决的问题。微小RNA（miRNA）属于内源性非编码小分子RNA，其可通过5'-种子区与调控一个或多个靶基因mRNA的3'-非翻译区（3'-untranslated region，3'-UTR）碱基互补配对，从而调控靶基因表达，进而起到类似抑癌或促癌基因的作用［4］。……