韩翠翠

(江苏省南京市江宁高级中学 211100)

高中阶段学生所学的微生物的计数方法有显微镜直接计数法和稀释涂布平板法，高考题中经常出现对这两种方法的考核，如2015年高考江苏卷第3题、新课标I卷第39题和四川卷第3题。然而在解题中，学生常常会对这两种方法的实验原理和计数搞混淆。现将这两种方法进行比较，并辅以例题进行解析，以便学生理解应用。

1 实验原理

1.1 显微镜直接计数法 显微镜直接计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板(也叫做血细胞计数板)，一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球计数板较厚，不能使用油镜，计数板下部的细菌不易看清。

血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区，计数区的刻度有两种：一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格；另一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格。但是，不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3。

例1 (2015江苏高考……