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产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量

2016-08-18程金龙朱元召倪晋东程茂基杨章平

动物营养学报 2016年8期

朱 泉 程金龙 朱元召 尹 龙 倪晋东 程茂基 杨章平

(1.安徽农业大学动物科技学院,合肥230061;2.江苏优仕生物科技发展有限公司,宿迁223831;3.安徽科技学院动物科学学院,凤阳233100;4.扬州大学动物科学与技术学院,扬州225009)



产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量

朱泉1程金龙2朱元召3*尹龙2倪晋东2程茂基1杨章平4

(1.安徽农业大学动物科技学院,合肥230061;2.江苏优仕生物科技发展有限公司,宿迁223831;3.安徽科技学院动物科学学院,凤阳233100;4.扬州大学动物科学与技术学院,扬州225009)

本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ-氨基丁酸(GABA)屎肠球菌,并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F6,进行形态学特征与革兰氏染色鉴定;再扩增菌株F6的16S rDNA基因,然后测定该基因序列和构建系统发育树;同时采用高效液相色谱(HPLC)法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结果表明:菌株F6菌落大而光滑、圆形、直径1~2 mm、边缘整齐、乳白色;在分离培养基上菌落周围形成透明圈,使分离培养基呈黄色;在MRS固体培养基上菌落不透明,周围有透明圈。革兰氏染色鉴定菌株F6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示,菌株F6的16S rDNA基因序列与GenBank数据库中屎肠球菌(Enterococcusfaecium)的相似性大于99%。HPLC法测定得到GABA标准曲线线性方程为Y=7 080 733.139 5X-4 511.692 7(R2=0.999 4),通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7.1 g/L,保留时间为7~10 min。结果提示,本试验筛选得到1株高产GABA的屎肠球菌F6。

屎肠球菌;γ-氨基丁酸;16S rDNA基因序列;高效液相色谱法定量;筛选

乳酸菌具有调节机体胃肠道微生态平衡、有益于畜禽健康、改善畜禽生产性能、减少环境污染、替代饲用抗生素等重要作用,在动物生产中的应用日益广泛。……

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