汤加勇　赵　华　贾　刚　刘光芒　陈小玲　蔡景义　吴彩梅

(四川农业大学动物营养研究所，成都611130)



硒蛋白x基因沉默和过氧化氢处理对人正常肝脏细胞中硒蛋白基因表达和抗氧化酶活性的影响

汤加勇赵华*贾刚刘光芒陈小玲蔡景义吴彩梅

(四川农业大学动物营养研究所，成都611130)

本试验旨在探讨硒蛋白x(Selx)基因沉默和过氧化氢(H2O2)处理对人正常肝脏细胞(LO2)中硒蛋白基因表达和抗氧化酶活性的影响，为探索Selx与其他硒蛋白之间的调控关系及Selx的功能奠定基础。对本实验室保存的Selx基因稳定沉默LO2细胞株(siSelx)和对照细胞株(CK)，利用噻唑兰(MTT)法比较其生长速率；siSelx和CK用200 μmol/L H2O2处理2.5 h后，采用荧光定量PCR技术考察25个硒蛋白基因的表达量；同时比较Selx基因沉默以及H2O2处理对LO2细胞株中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)的影响。结果显示：1)Selx基因沉默显著降低了LO2细胞株的生长速率(P<0.05)；2)Selx基因沉默显著上调了Gpx6、Txnrd2、Seli基因的表达量(P<0.05)，显著下调了Dio2、Dio3、Selm、Sepw1基因的表达量(P<0.05)；H2O2处理显著上调了Dio1基因的表达量(P<0.05)，显著下调了Gpx2基因的表达量(P<0.05)；Selx基因沉默后H2O2处理显著上调了Gpx6、Txnrd2、Dio1基因的表达量(P<0.05)，显著下调了Txnrd3、Dio2、Selm、Sepw1、Selv基因的表达量(P<0.05)；3)Selx基因沉默显著提高了LO2细胞株GSH-Px活性(P<0.05)，显著提高了SOD的活性(P<0.05)；Selx基因沉默后H2O2处理显著提高了GSH-Px活性(P<0.05)。由此可见，Selx基因沉默降低了LO2细胞株的生长速率，Selx基因沉默后H2O2处理影响部分硒蛋白基因在细胞中的表达量，同时也影响了GSH-Px、SOD活性。

Selx基因；沉默；H2O2；表达

硒(Se)是哺乳动物新陈代谢所必需的基本微量元素，在动物的生长、繁殖等方面起着重要作用。Se在动物体内主要以硒蛋白的形式来发挥其多种生理功能，在人中已分离得到了25种硒蛋白[1]。很多硒蛋白在动物体内是作为细胞重要的抗氧化防御系统，起着清除氧自由基、保护生物膜完整等功能[2-4]。在动物饲粮中添加一定量的Se可以增加体内硒蛋白的表达，从而增强动物机体的免疫及抗氧化功能等[3-4]。到目前还有很多硒蛋白的功能和作用机理不完全清楚，其中就包含硒蛋白x(Selx)。……