郭咏梅　张博綦　石惠宇　闫素梅　史彬林　郭晓宇

(内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特010018)



二乙烯三胺/一氧化氮聚合物诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型的建立

郭咏梅张博綦石惠宇闫素梅*史彬林郭晓宇

(内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特010018)

泌乳期间的奶牛由于代谢旺盛，往往会产生大量一氧化氮(NO),诱导发生氧化应激，进而对细胞产生毒害作用。本试验旨在探讨二乙烯三胺/一氧化氮聚合物(DETA/NO)诱导奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells，BMEC)氧化应激的损伤条件，并建立氧化应激模型。本试验利用不同浓度(0、10、30、100、500、1 000 μmol/L)的DETA/NO作为刺激源，作用BMEC 2、4、6、8、12、24 h，通过测定细胞存活率、抗氧化指标、炎症因子和NO含量及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)活性，筛选适宜的DETA/NO作用时间及作用浓度，建立BMEC氧化损伤模型。结果表明：1 000 μmol/L的DETA/NO作用细胞6 h，细胞存活率降低为74.27%，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性也均显著降低(P<0.05)，然而，iNOS活性，NO、白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、丙二醛含量则呈现相反的变化规律，显著升高(P<0.05)。综上所述，1 000 μmol/L的DETA/NO处理细胞6 h，可构建理想的BMEC氧化应激模型。

二乙烯三胺/一氧化氮聚合物；奶牛乳腺上皮细胞；氧化损伤

氧化应激是指机体在需要清除体内老化的细胞或在遭受各种有害刺激时，体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species，RNS)产生过多，氧化程度超出机体对氧化物的清除能力，氧化系统与抗氧化系统失衡，使机体处于氧化应激状态，并最终导致组织损伤，引起疾病、衰老、甚至死亡。处于泌乳期的奶牛代谢旺盛，尤其在围产期和泌乳高峰期，由于机体产生较多的自由基而超过机体的防御能力，破坏蛋白质、核酸等生物大分子，使机体正常的代谢发生紊乱，即产生氧化应激[1]。……