李彧　连建奇　张野　王九萍　魏欣　张鸿　曹宁家　田颖　白雪帆



Notch2分子对慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞功能的影响及意义

李彧连建奇张野王九萍魏欣张鸿曹宁家田颖白雪帆

目的观察慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T细胞中Notch2分子的表达情况，并分析Notch2分子对CD8+T细胞功能的影响。方法选择30例慢性乙型肝炎患者和15名健康对照者，应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞，应用免疫磁珠法分离CD8+T细胞，应用反转录实时定量PCR法检测CD8+T细胞中Notch2 mRNA的表达水平。将分离的CD8+T细胞与HepG2.2.15细胞混合培养，并加入抗Notch2抗体，培养48 h后应用CCK-8法检测细胞增殖，应用ELISA法检测上清中IFN-γ、IL-2及TNF-α的表达水平。结果慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞中Notch2 mRNA的表达水平明显升高，较健康对照者升高超过5倍。应用抗Notch2抗体抑制Notch2分子信号通路后，混合培养细胞的增殖水平(8.88±1.56)×105较同型对照组(4.47±1.13)×105和空白对照组(4.39±0.95)×105均明显升高，培养上清中的IFN-γ：3815±807 pg/mL和TNF-α：346.3±77.3 pg/mL的表达水平也较同型对照组IFN-γ：1316±484 pg/mL；TNF-α：139.8±40.1 pg/mL及空白对照IFN-γ：1383±604 pg/mL；TNF-α：124.0±45.5 pg/mL组显著升高，差异均具有统计学意义。结论HBV感染可能通过提高Notch2的表达抑制CD8+T细胞的杀伤功能，诱导机体免疫耐受，导致感染慢性化。

慢性乙型肝炎；Notch1；Notch2；CD8+T淋巴细胞

乙型肝炎严重威胁人类的生命健康。乙型肝炎病毒(HBV)是一种不直接引起细胞破坏的嗜肝DNA病毒，可以导致慢性肝炎、肝硬化乃至肝癌[1]。其肝脏损伤的机制主要是由机体免疫系统介导的，并依赖于病毒的不断复制。在急性自限性乙型肝炎患者体内可以发现多特异性的较高强度的CTL和Th细胞反应，而在慢性HBV感染者体内病毒特异性CTL和Th细胞存在数量和功能上的缺陷[2]。……