骨折早期调节RANKL表达对骨折愈合影响的实验研究
2016-08-06沈业彤张学斌吴丽红刘果彤王琳陶敏燕徐凤琳
沈业彤 张学斌 吴丽红 刘果彤 王琳 陶敏燕 徐凤琳
齐齐哈尔医学院附属第一医院骨外科,齐齐哈尔 161041
OPG/RANKL/RANK系统自1997年被发现以来,被认为是骨科研究领域中的一项重大突破,许多细胞因子、激素等影响因素均可通过骨保护素(OPG)的竞争机制来调节核因子-κB受体活化因子配体(RANKL) 的表达, 从而调控OPG、RANKL和核因子-κB受体活化因子(RANK) 之间的比值,直接对破骨细胞的分化和功能产生决定性作用,OPG由成骨细胞及骨髓基质细胞分泌,可与RANKL结合,竞争性抑制其表达, 来调节破骨细胞的活性及凋亡过程,体内有很多激素及调控因子均可通过影响OPG/RANKL 的比值来调节其表达,并影响骨代谢。骨折早期的骨吸收阶段,破骨细胞起着重要的作用,OPG在软骨内成骨过程中也有着重要的影响,既往研究表明,BMP、雌激素、IL-1、 1, 25-( OH)2D3、TGF和TNF等都能通过调节OPG mRNA的表达[1-5],通过竞争性抑制来调节RANKL的表达,使破骨细胞的活性降低,减少骨吸收,减轻固定后废用性骨质疏松,对缩短骨折的愈合时间,防治骨缺损、骨坏死、骨折不愈合及再骨折均具有重要的临床意义。本项目通过对鼠的骨折模型进行实验治疗,以探讨应用基因技术治疗骨折模式的可行性及有效性,同时为进一步研究该系统对骨生成及代谢方向的影响机制奠定实验基础。
1 材料和方法
1.1 实验动物和试剂
重组人骨保护素Fc 融合蛋白(Recombinant Human OPG-Fc)剂型(50 μg/支)、二甲苯溶液、蜂蜡、酒精溶液、苏木精染液、石蜡溶液、1%盐酸乙醇、1%伊红酒精溶液、树胶等。 TRAP 免疫组化染色试剂盒。健康雌性3个月龄SD大鼠48只,体重270 g~320 g,由齐齐哈尔医学院动物实验研究室提供。……
