范 磊 李 诚 李 堂



抗CD20单克隆抗体与IL-10基因联合应用对NOD鼠肝脏PDX-1的影响

范 磊 李 诚 李 堂

【摘要】目的 察抗CD20单克隆抗体与IL-10基因联合应用于已发病的NOD鼠，观察对其肝脏中PDX-1表达的影响。方法 17-20周龄雌性发病的NOD小鼠24只，随机分为A、抗CD20单克隆抗体组（于发病第1 d尾静脉注射Anti-CD20 500 µg，并于第3、6、9 d尾静脉注射Anti-CD20 250 µg）；B、抗CD20单克隆抗体+IL-10基因组（第1 d尾静脉注射Anti-CD20 500 µg + IL-10基因0．1 ml，后相同时间尾静脉注射Anti-CD20 250 µg + IL-10基因0．1 ml）；C、IL-10基因组（IL-10基因0．1 ml）；D生理盐水对照组（生理盐水0．1 ml）。发病后每周监测2次体重；每天同一时间监测血糖，若血糖≥25 mmol/L，按20 U/kg皮下注射来得时。观察6周后行免疫组化检测肝脏中PDX1蛋白相对表达量，并行PCR了解PDX-1基因表达情况。结果 联合治疗组肝脏中PDX-1基因表达及蛋白表达水平高于其他组，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 抗CD20单克隆抗体与IL-10基因组联合干预可提高可促进PDX-1的表达。

【关键词】抗CD20单克隆抗体；白细胞介素10；胰腺-十二指肠同源框1；肝脏；1型糖尿病

Objective To observe the influence of liver PDX-1 expression in NOD mice after interfered by anti-CD20 monoclonal antibody combined with inter-leukin10． Methods Twenty-four female NOD mice（17-20weeks old）were randomly divided into four groups：A Anti-CD20，B Anti-CD20+IL-10，C IL-10 and D Normal Control（NC）groups． The first time group A and B were respectively injected of 500 µg Anti-CD20 antibody，combined 500 µg Anti-CD20 antibody． After the 3、6、9 day，group A、B、C、D were injected of 250 µg Anti-CD20 antibody，combined 250 µg Anti-CD20 antibody，0．1 ml IL-10 and 0．1 ml physiological saline． All mice were twice weekly monitored for weight，and monitored for blood glucose at the same time everyday． After 6weeks，the local expression of PDX-1 were observed by immunohistochemistry． The gene expression of PDX-1 were observed by PCR． Results After combined Anti-CD20 and IL-10 intervention，the liver PDX1 expression was upregulated（P＜0．05）．Conclusion The combined administration of Anti-CD20 and IL-10 increased increased the expression of PDX1 in the liver．

【Key words】 Anti-CD20 antibody，Interleukin 10，PDX-1，Liver，T1DM

1型糖尿病（T1DM）是一种严重危害青少年健康一种自身免疫性疾病，且发病率呈上升趋势。目前终生胰岛素注射治疗仍为治疗的主要手段，即使胰岛素制剂及用法不断改善，仍给患儿的生活带来很大不便，因此寻求胰岛β细胞的再生，延缓胰岛炎的进程，保护残存胰岛β细胞功能，成为研究T1DM治疗的热点之一。目前认为1型糖尿病病情进展过程与Th1/Th2失衡有关［1］，且β细胞在发病过程中亦发挥着重要作用。NOD鼠因遗传学特征和免疫学特征与人类近似被认为是1型糖尿病的最佳实验模型。NOD鼠通常于4～5周开始出现胰岛炎，并进行性破坏，于12周龄时开始出现糖尿病症状，到30周龄时累计发病率可高达80%［2］。……