李苗苗， 王海啸， 陶国全

(1南京医科大学附属淮安第一医院消化内科，淮安　223300； 2南京医科大学附属淮安第一医院普通外科； *通讯作者，E-mail:13770875120@163.com)

CDKN3基因在肝癌中的表达及其对肝癌细胞生长、细胞周期的影响

李苗苗1*， 王海啸2， 陶国全2

(1南京医科大学附属淮安第一医院消化内科，淮安223300；2南京医科大学附属淮安第一医院普通外科；*通讯作者，E-mail:13770875120@163.com)

摘要：目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(cyclin dependent kinase inhibitor 3，CDKN3)基因在肝癌组织中的表达，以及被沉默后对肝癌细胞生长和细胞周期的影响。方法采用普通及定量RT-PCR、蛋白免疫印迹法检测36例手术切除的肝癌组织和匹配的癌旁组织以及人肝癌细胞株中CDKN3的表达；观察沉默CDKN3表达后肝癌细胞生长曲线、克隆形成能力和细胞周期的变化。结果与癌旁样本相比，CDKN3基因在63.9%(23/36)肝癌组织中的mRNA表达显著上调，差异具有统计学意义(P<0.000 1)；RNA干扰技术沉默CDKN3表达后，MHCC-LM3和Huh-7细胞生长和克隆形成能力被明显抑制(P<0.05)；应用流式细胞术发现沉默CDKN3的表达能够诱导肝癌细胞发生G0/G1期阻滞(P<0.05)。结论CDKN3基因在肝癌中表达上调，其通过影响细胞周期分布从而促进肝癌细胞的增殖，在肝癌发生、发展过程中可能发挥重要作用。

关键词：原发性肝癌；细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3；RNA干扰；基因沉默；细胞周期

原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的恶性肿瘤之一。2008年全球新发肝癌748 300例，死亡695 900例，其中约50%病例发生在中国[1]。近年来，我国肝癌发病率有上升趋势，居我国恶性肿瘤死亡率第二位，是全球肝癌发病率、死亡率最高的国家[2]。

肝癌的发生发展是一个多基因多通路变异累积逐渐演变的复杂过程，其中癌基因的激活或抑癌基因的失活在肝癌的发生及发展过程中扮演着重要的作用[3,4]。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制基因3(CDKN3)属于激酶抑制蛋白CIP/KIP基因家族，其位于人类染色体14q22，所编码的蛋白含212个氨基酸，CDKN3被认为在细胞周期调控中发挥重要作用[5]。……