陈以衡 陶姝宇 刘旭平 谭文松

（华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237）

微载体浓度与细胞接种密度对 ST 细胞生长的影响

陈以衡 陶姝宇 刘旭平 谭文松

（华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237）

选择合适的微载体浓度、细胞接种密度以提高微载体利用率，优化微载体培养体系猪睾丸细胞（Swine testicle cells）的贴附生长与维持。使用DMEM补加10%血清、LSM（Low serum medium）两种培养基考察微载体浓度、细胞接种密度对细胞生长维持的影响，进而比较ST细胞在不同条件下对Cytodex 1微载体的利用率。结果显示，使用LSM在T150方瓶中连续传代培养30 d，平均比生长速率为0.626 d-1，是DMEM补加10%FBS培养基的1.15倍。选择10×105cells/mL细胞接种3 g/L Cytodex 1搅拌瓶体系，最大细胞密度为38.3×105cells/mL，微载体利用率上升到58.8%。在灌注培养体系中培养ST细胞15 d，最终细胞密度达到36.6×105cells/mL，扩增了13.6倍。微载体悬浮培养的使用一方面有利于ST细胞的贴附与生长，实现高密度生长，另一方面增加了微载体的使用成本，选择合适的微载体浓度、细胞接种密度，能够最大化利用微载体与培养基中的营养物质实现细胞的最优生长。

微载体；ST细胞；猪瘟病毒；细胞密度

猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的一种急性、发热、高度接触性的严重传染病［1］。由于猪瘟流行爆发给养猪业、国际贸易和食品安全带来的严重危害，世界动物卫生组织（OIE，2002）将猪瘟列为法定必须上报的动物传染病之一，我国出台的《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》中也将其列为优先防治的五种一类动物疫病之一［2，3］。目前国内贯彻预防为主的方针，免疫接种猪群猪瘟兔化弱毒疫苗（HCLV）应对全国各个地区猪瘟的不间断散发流行［4］。……