张霞，赵良娟，高琳，温华蔚，王飞雪，董焱，刘掘茫，刘寅，郑文杰，*（.天津出入境检验检疫局，天津30046；.南开大学，天津30007）



利用邻位连接技术检测花生过敏原成分

张霞1，赵良娟1，高琳1，温华蔚1，王飞雪2，董焱2，刘掘茫1，刘寅2，郑文杰1，*
（1.天津出入境检验检疫局，天津300461；2.南开大学，天津300071）

摘要：建立一种新型花生过敏原成分的快速筛选检测方法--邻位连接技术检测方法。针对花生过敏原选择适当的鼠源单克隆抗体，并合成针对花生过敏原的兔源多克隆抗体然后与磁颗粒偶联，而后将羊抗兔二抗与一条DNA分子耦联制成亲和探针1，将另一条寡核苷酸序列与羊抗鼠二抗耦联制成亲和探针2，上述成分能够与一连结DNA组合成邻位连接复合物，建立邻位连接检测花生过敏原的方法。使用3种花生过敏原标准品和10种确定不含花生过敏原的样本进行特异性试验；通过稀释花生过敏原标准品进行灵敏度验证。建立方法具有很好的特异性；检测标准品的灵敏度为0.01 ng/mL，比普通ELISA试剂盒灵敏度提高了1 000倍。建立的邻位连接检测花生过敏原的方法能够检测出使用目前常规方法不能检测到的花生过敏原，具有重要的实际意义。

关键词：花生过敏原；邻位连接；亲和探针；磁颗粒

食物过敏目前已被认为是严重的公共卫生问题。根据美国FDA资料统计，在美国，2%的成年人和5%的婴幼儿患有食物过敏症，每年大约30 000人需要临床紧急治疗，2 000人住院，150人死于食物引起的过敏反应［1-2］。据有关报告，我国的发病率高于发达国家［3］。……