张航 符改梅 张婷

大肠癌EGFR、HER-2、VEGF表达及对靶向治疗的指导作用

张航 符改梅 张婷

目的 通过实验探讨大肠癌中表皮生长因子受体（EGFR）、人表皮生长因子受体-2（HER-2）以及血管内皮生长因子（VEGF）表达，旨在为靶向治疗提供理论指导。方法 选取大肠癌患者36例，取肿瘤组织，经处理行PV-9000二步法免疫组化法检测，观察大肠癌肿瘤组织中EGFR、HER-2、VEGF的表达，同时分析与其余病理组织的关系。结果 EGFR阳性率为58.33%，HER-2阳性率为66.67%，VEGF阳性率为58.33%；EGFR、HER-2、VEGF与肿瘤大小、侵袭深度以及淋巴结转移表现为密切相关。结论 EGFR、HER-2、VEGF的表达与大肠癌的侵袭、生长、转移都有较大关联，故通过三者的联合筛查更利于高危患者的早期判断，同时还可为靶向治疗提供用药指导。

大肠癌；EGFR；HER-2；VEGF；表达

大肠癌是当前临床中最常见的一种消化系统恶性肿瘤，尽管关于大肠癌的治疗方法非常多，但仍然无法对其死亡率和发病率进行有效的控制，且仍然表现为逐年攀升[1]。就当前所掌握的情况来看，肿瘤的侵袭和转移是导致大肠癌患者死亡的主要因素。截至目前为止，临床中并无关于大肠癌转移的预防方法。有研究报道表示[2]，表皮生长因子受体（EGFR）、人表皮生长因子受体-2（HER-2）以及血管内皮生长因子（VEGF）的表达与大肠癌的转移和肿瘤的侵袭有着非常密切的关联。此外，关于3种分子的靶向治疗药物已成功研制，并被用于临床试验中[3]。但关于三者的综合研究资料却非常少，鉴于此，本文通过实验对大肠癌中EGFR、HER-2、VEGF表达进行分析，旨在为靶向治疗提供理论指导。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取陕西省宝鸡市金台医院2013年1月～2014年12月大肠癌根治术患者中选取36例，切取肿瘤组织，行石蜡包埋和甲醛固定，同时性HE染色组织学确诊。所有患者均未接受放化疗治疗。其中女17例，男19例，年龄35～75岁，平均年龄（67.34±13.31）岁，肿瘤大小2.2～15.0cm，平均（5.02±2.84）cm；经Dukes分期，结果显示为6例D期，7例C期，17例B期，6例A期。

1.2 方法 取病理组织5μm厚切片，运用兔抗人VEGF单克隆抗体、兔抗人EGFR单克隆抗体、兔抗人GER-2单克隆抗体。通过PV-9000二步法免疫组化法进行测试，试剂盒购自北京中杉公司，且操作均严格按照试剂盒要求来实施。每组实验均同时设置2组，分别为阴性对照组和阳性对着组，同时选用PBS替代一抗来作为阴性对照组，而针对已知的阳性切片则将其作为阳性对照组。

1.3 判断标准[4]HER-2定位在细胞浆、EGFR定位在细胞膜和细胞浆、VEGF定位在细胞膜。EGFR与VEGF均根据阳性细胞数以及染色强度来进行计算，再根据得分作为其判断依据。阳性细胞数评分标准：4分（≧75%）；3分（51%～74%）；2分（26%～50%）；1分（≦25%）；染色强度评分标准：3分（棕褐色）；2分（棕黄色）；1分（淡棕色）；综合评分标准：6～7分（+++）；4～5分（++）；2～3分（+）；0～1分（-）。

2 结果

2.1 EGFR、HER-2、VEGF在大肠癌肿瘤组织中的表达 HER-2主要在胞膜上表达，并主要呈现为棕褐色颗粒状；EGFR主要在细胞浆和胞膜上表达，且呈现为棕黄色细颗粒；VEGF同样在胞膜上表达，且呈现为棕褐色颗粒状。肿瘤的间质均未着色。另根据阳性结果显示，EGFR阳性患者21例，阳性率为58.33%；HER-2阳性患者24例，阳性率为66.67%；VEGF阳性患者21例，阳性率为58.33%。

2.2 EGFR、HER-2、VEGF表达与病理特点的关系EGFR、HER-2、VEGF与肿瘤大小、侵袭深度以及淋巴结转移表现为较大关联。见表1。

表1 EGFR、HER-2、VEGF表达与病理特点的关系（n=36）

3 讨论

EGFR是一种原癌基因HER-1的产物，属于HER/crbB非常重要的成员，在各种重要细胞信号通路的激活中起到了决定性作用[5]。HER-2与EGFR相同，均属于HER/crbB的成员之一，并且两者的同源性达到了50%以上，这使得它们的功能和结构都非常相似，其主要对细胞生长分化进行调节[6]。VEGF属于血管内皮细胞刺激因子，具有较高的特异性，有研究表示，VEGF在多种肿瘤中均有不同的表达，并且与预后有着较大的关联性[7]。根据本研究结果来看，EGFR阳性率为58.33%，HER-2阳性率为66.67%，VEGF阳性率为58.33%。这表明EGFR、HER-2、VEGF的测定可谓分子靶向治疗提供用药方向。

本研究认为通过对EGFR、HER-2、VEGF进行联合检测，可有效提高高危患者的筛查，同时还可作为大肠癌患者预后效果的判断标准。而关于大肠癌的靶向治疗，本研究认为还需要解决以下几点问题：（1）分子的生物学筛查问题。迄今为止，在文献报道和临床研究中，多运用的是免疫组化法来实现对EGFR、HER-2、VEGF的测定；这种方式极易因抗体实际的操作水平和质量等因素受到影响，同时无法进行有效的定量检测，为此，我们需要进一步研究。（2）对靶向治疗的用药剂量和用药时机进行确定[8]。（3）进一步了解EGFR、HER-2、VEGF与靶向治疗药物之间的关系。

综上所述，伴随着对大肠癌的深入了解，EGFR、HER-2、VEGF的测定有助于提高筛选率，同时也是靶向药物治疗的重要发展方向。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.9.012

陕西 721000 陕西省宝鸡市金台医院 （张航 符改梅 张婷）