ASGPR与HBV preS1蛋白之间相互作用的验证
2016-05-09刘小静陈云茹杨雪亮蔺淑梅
张 曦,刘小静,陈云茹,孔 颖,杨雪亮,叶 峰,蔺淑梅
(西安交通大学第一附属医院感染科,陕西西安 710061)
ASGPR与HBV preS1蛋白之间相互作用的验证
张 曦,刘小静,陈云茹,孔 颖,杨雪亮,叶 峰,蔺淑梅
(西安交通大学第一附属医院感染科,陕西西安 710061)
目的 验证去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)与乙肝病毒前S1蛋白(HBV preS1蛋白)之间的相互作用,确认ASGPR作为乙肝病毒肝细胞膜受体在介导乙肝病毒感染的分子机制中的作用。方法 分别用哺乳动物双杂交及体外免疫共沉淀技术验证ASGPR与HBV preS1蛋白之间的相互作用,操作方法参照试剂盒说明书进行。结果 哺乳动物双杂交实验结果提示,ASGPR与HBV preS1蛋白在细胞环境中具有相互作用;免疫共沉淀实验结果提示,ASGPR与HBV preS1蛋白在非细胞环境中具有相互作用。结论 ASGPR可能是介导HBV入侵的肝细胞膜受体之一。
乙型肝炎病毒;preS1蛋白;ASGPR;蛋白质-蛋白质相互作用;哺乳动物双杂交;免疫共沉淀
目前,有关乙肝病毒(HBV)感染肝细胞的具体机制尚未阐明。已有研究显示,HBV也是首先通过其病毒吸附蛋白(virus attachment protein,VAP)与肝细胞膜上相应的受体结合,进而进入细胞内完成其复制周期的。因此,对HBV的肝细胞受体进行深入研究对于阐明其致病机制,以及制定有效的防治措施具有重要意义。众多研究显示,HBV前S1蛋白(preS1蛋白)是HBV包膜蛋白中与肝细胞膜受体直接结合的部位[1],因此有关肝细胞膜上与该区域结合的候选受体的研究也最多。目前已知的在肝细胞膜上能与preS1蛋白结合的分子均是蛋白质[2-3],如IL-6、IgA、人源唾液酸糖蛋白(ASGPR)、HBV结合因子(HBVBF)、p80(protein 80)、HBV结合蛋白(HBV-BP)、LPL、NACA、GRP75、牛磺胆协同转运多肽等[4-18]。……
