殷长江，董保忠，杜晓光，张荣伟

(1山东省交通医院，济南250031；2济南军区总医院)



脑胶质瘤患者围术期脑脊液中HGF、TNF-α、IL-17水平变化及意义

殷长江1，董保忠1，杜晓光1，张荣伟2

(1山东省交通医院，济南250031；2济南军区总医院)

摘要：目的观察脑胶质瘤患者围术期脑脊液中肝细胞生长因子(HGF)、肝瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)17水平变化，探讨其临床意义。方法 选择脑胶质瘤患者42例(观察组)、体检健康者19例(对照组)，观察组分别于术前1天及术后第1、3、5天，对照组于体检时取脑脊液采用酶联免疫吸附法检测HGF，采用化学发光免疫分析仪检测TNF-α、IL-17，分析肿瘤病理分级与三者的关系。结果术前1 d及术后第1、3、5天观察组HGF、TNF-α IL-17水平高于对照组(P均<0.05)。观察组肿瘤病理分级Ⅲ、Ⅳ级患者脑脊液中HGF、IL-17水平高于Ⅰ、Ⅱ级， TNF-α水平低于Ⅰ、Ⅱ级,比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论脑胶质瘤患者围术期脑脊液中HGF、TNF-α、IL-17水平明显升高，且肿瘤病理分级越高三者水平越高。

关键词：脑胶质瘤；肝细胞生长因子；肿瘤坏死因子α；白细胞介素17

脑胶质瘤是成人中枢神经系统最为常见的恶性肿瘤，约占颅内肿瘤的45%[1]，其显著特征是肿瘤细胞的恶性增殖及侵袭性生长，复发率高、预后差，患者生存期短。目前脑胶质瘤的诊断仍靠术前影像学检查和术后的病理检查。随着对脑胶质瘤生物分子学的深入研究，逐渐认识到细胞因子与脑胶质瘤的发生、发展关系极为密切。本研究观察脑胶质瘤患者围术期脑脊液中肝细胞生长因子(HGF)、肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)17水平变化，探讨其临床意义。

1资料与方法

1.1临床资料选取山东省交通医院神经外科和济南军区总医院神经外科2013年10月～2015年5月收治的脑胶质瘤患者42例(观察组)，均行显微镜下脑胶质瘤切除手术,术后病理检查确诊。其中，男24例、女18例，年龄(43±1.3)岁。术后肿瘤病理分级：Ⅰ、Ⅱ级22例，Ⅲ、Ⅳ级20例。同期选取体检健康者19例(对照组)，男11例、女8例，年龄(39±1.6)岁。研究对象均排除年龄>75岁；合并某些系统疾病而无法耐受手术者；有腰穿禁忌证或不配合行腰穿者。两组性别、年龄比较差异无统计学意义。

1.2脑脊液中HGF、TNF-α、IL-17检测观察组分别于术前1 d及术后第1、3、5天，对照组于体检时行腰椎穿刺取脑脊液10～15 mL。取5 mL采用酶联免疫吸附法检测HGF，严格按照试剂盒(由深圳晶美生物工程有限公司提供)说明书进行操作。另取5 mL离心(3 000 r/min,15 min)分离后提取上清液，置于-80 ℃下待测。取冻融的脑脊液标本，采用化学发光免疫分析仪(西门子ADVIA Centaur)检测TNF-α、IL-17。

2结果

2.1两组脑脊液HGF、TNF-α、IL-17水平比较详见表1。

表1　两组脑脊液HGF、TNF-α、IL-17水平

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.2脑胶质瘤不同病理分级患者术前1天脑脊液HGF、TNF-α、IL-17水平比较脑胶质瘤病理分级Ⅰ、Ⅱ 级患者HGF、TNF-α、IL-17水平分别为(1 823.4±331.3)、(15.6±2.4)、(1 096.9±101.2)pg/mL，Ⅲ、Ⅳ级分别为(2 361.7±297.1)、(11.2±2.3)、(1 201.9±91.5)pg/mL；Ⅲ、Ⅳ级患者脑脊液中HGF、IL-17水平高于Ⅰ、Ⅱ级患者，TNF-α水平低于Ⅰ、Ⅱ级患者,比较差异有统计学意义(P均<0.05)。

3讨论

研究证实,HGF通过刺激、激活血管内皮细胞从而促进血管的生长[2，3]；通过增加细胞有丝分裂次数、缩短细胞周期来实现肿瘤细胞的恶性增殖[4]；通过诱导酪氨酸磷酸化和激活整合素以促进肿瘤细胞转移扩散；通过与c-Met特异性结合激活HGF/c-Met途径发挥其他生物学特性，可以上调尿激酶型纤溶酶原激活物及受体的表达；通过水解细胞外基质促进新生血管形成，促进肿瘤的浸润及扩散。以上表明HGF在肿瘤的生长、侵袭、增殖、转移中起重要作用。研究[5，6]证实，HGF在脑胶质瘤中的重要作用及其高表达与胶质瘤级别呈正相关性。本研究结果与以上理论相符。

TNF-α通过结合细胞膜调节打破细胞酸碱平衡能抑制肿瘤细胞,通过活化磷脂酶而切断DNA序列，杀死肿瘤细胞[7]；TNF-α还可通过损伤血管内皮细胞[8]，从而导致血管损伤，最终引起肿瘤出血坏死；TNF-α作为炎症因子之一，能够使白细胞的吞噬能力增强。在机体正常情况下TNF-α的来源主要是免疫细胞，也可来源于肿瘤细胞。TNF-α在人体分布很广泛，主要存在于外周血循环系统，而中枢神经系统的小胶质细胞、星形细胞也可产生，在脑组织和脑脊液中也能微量表达，在脑胶质瘤发生后需要机体产生免疫应答时，可促进TNF-α大量分泌。研究[9]证实TNF-α通过调节胶质瘤细胞内的凋亡基因与抑癌基因的比例，发挥抗肿瘤作用。本研究结果与以上结论相符，观察组TNF-α水平高于对照组，说明随着脑胶质瘤的发生，其水平明显增高。也有研究[10]指出，过量的TNF-α可以降低人机体的免疫力，减少免疫应答，反而有促肿瘤作用，从而表现为负反馈性的TNF-α降低。本研究中Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤患者脑脊液中TNF-α水平高于Ⅲ、Ⅳ级，证实荷瘤状态的高级别脑胶质瘤对TNF-α的抑制。

IL-17为促炎症因子，表达于胸腺细胞、上皮细胞及血管内皮细胞[11]。IL-17可调节炎症反应，作用机制为细胞趋化作用[12~14]。研究发现[15]，IL-17具有促胶质瘤和抗肿瘤免疫的双重作用。正常人脑胶质细胞仅有极微量的IL-17表达，相比血液中高表达，由于脑胶质瘤的血-脑脊液屏障的破坏，在IL-17也可渗透到肿瘤中，在正常脑组织、低级别和高级别脑胶质瘤中表达依次升高。原因可能为Th17在脑胶质瘤中的直接浸润，促进了IL-17分泌。与本研究结果相符。

本研究结果显示，围术期观察组脑脊液HGF、TNF-α、IL-17水平未发现明显规律性变化，其原因可能是肿瘤切除后仍有大量细胞因子残留在瘤周组织及脑脊液中；另外术后炎症刺激、术区水肿也是影响HGF、TNF-α、IL-17分泌的因素，有待于进一步研究证实。

综上所述，脑胶质瘤患者脑脊液中HGF、TNF-α、IL-17水平明显增高，推测三种细胞因子在肿瘤的发生发展过程中起重要作用；对三种细胞因子进行检测有助于对不同病理级别的胶质瘤进行初步诊断。

参考文献：

[1] 王忠诚.王忠诚神经外科学[M].武汉：湖北科学技术出版社,2004:497-512.

[2] Yong WM, Rha SY, Zhang X, et al. Increments of alpha-dystroglycan expression in liver metastasis correlate with poor survival in gastric cancer[J]. J Surg Oncol, 2009,100(6):459-465.

[3] Furge KA, Zhang YW, Vande Woude GF. Met receptor tyrosine kinase: enhanced signaling through adapter proteins[J]. Oncogene, 2000,19(49):5582-5589.

[4] 楚胜华,马延斌,冯东福,等.脑胶质瘤患者血清中肝细胞生长因子定量测定的临床意义[J]. 中华临床医师杂志(电子版), 2010,4(8):1218-1220.

[5] Yun S, Koh JM, Lee KS, et al. Expression of c-MET in Invasive Meningioma[J]. J Pathol Transl Med, 2015,49(1):44-51.

[6] 秦丽娟,薛一雪,谷艳婷,等.肿瘤坏死因子-α在缓激肽开放血肿瘤屏障过程中的作用[J].实用医学杂志,2012,28(6):899-902.

[7] 林勇,韩宗超,薛德麟.跨膜型和跨膜稳定型肿瘤坏死因子-α对脑胶质瘤生长的影响[J].中国临床神经外科杂志,2001,6(3):173-175.

[8] 陈波,陈谦学.显微镜下全切或次全切术治疗脑胶质瘤的综合疗效及预后影响因素分析[J].疑难病杂志,2015,14(8):793-796,799.

[9] 林勇，张燕，张智峰，等.肿瘤坏死因子-α 的基因表达促进脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究[J].华中科技大学学报(医学版)，2002,31(6)：640-643.

[10] 陈进宏，蔡端，张群华.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对裸鼠胃癌移植瘤的生长抑制作用与死亡相关蛋白3的关系[J].中华实验外科杂志，2010,23(10)：1215-1217.

[11] 宋伟正,毛伯镛,毛庆,等.IL-17及IL-17R在人脑胶质瘤中的表达[J].中国微侵袭神经外科杂志,2010,15(11):515-518.

[12] 郑鲲鹏,宋辉,樊明德,等.Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤中的测定[J].山东大学学报(医学版),2012,50(6):87-91.

[13] Thornburg NJ, Shepherd B, Crowe JE. Transforming growth factor beta is a major regulator of human neonatal immune responses following respiratory syncytial virus infection[J]. J Virol, 2010,84(24):12895-12902.

[14] Jie Z, Liang Y, Hou L, et al. Intrahepatic innate lymphoid cells secrete IL-17A and IL-17F that are crucial for T cell priming in viral infection[J]. J Immunol, 2014,192(7):3289-3300.

[15] 蒋伟峰，刘窗溪，高方友.白细胞介素-17及其受体在脑胶质瘤中的表达研究进展 [J].临床神经外科杂志，2014，11(3)：156-158.

(收稿日期：2015-11-03)

中图分类号：R739.41

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)09-0051-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.019